[发明专利]血红蛋白的分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及血红蛋白的分析方法及分析用试剂盒。

背景技术

血红蛋白中，糖化血红蛋白的1种即血红蛋白A1c的量作为血糖值的指标，被利用于包括糖尿病和代谢综合症(Metabolic Syndrome)在内的生活习惯病的检查及血糖管理中，推测以后也会成为重要的指标之一。血红蛋白A1c中，稳定型血红蛋白A1c是特别重要的指标，需求能够更准确地测定稳定型血红蛋白A1c的技术。稳定型血红蛋白A1c能够用电泳或HPLC等分离分析方法进行分析。

根据支撑体的有无、支撑体的种类等，电泳存在各种方法，例如已知有聚丙烯酰胺电泳、琼脂糖凝胶电泳、淀粉凝胶电泳、滤纸电泳、醋酸纤维素膜电泳、电色谱法、无载体(自由流)电泳、毛细管电泳法等。作为采用琼脂糖凝胶电泳法的分析，例如提出了使用添加有硫酸软骨素等硫酸化多糖类的琼脂糖凝胶来分离糖化血红蛋白的方法等。作为采用毛细管电泳的分析方法，例如提出了使用毛细管电泳法的一种即电色谱法并通过使泳动用缓冲液中含有硫酸软骨素等聚阴离子或聚阳离子从而在短时间内分析试样的方法(日本特开平09-105739号)；将泳动装置微芯片化从而使分析装置小型化的方法(日本特开2009-186445号及日本特开2009-109230)等。

发明内容

用电泳或HPLC等分离分析方法来分析血红蛋白时，存在由于血红蛋白发生变性而使测定值产生误差的问题。例如，在电泳的情况下，随着泳动液的温度上升，血红蛋白发生氧化(高铁血红蛋白化)。此外，即使在HPLC的情况下，随着时间的经过，有时血红蛋白也会发生氧化(高铁血红蛋白化)。因此，本发明提供一种在分离分析方法中能够抑制血红蛋白的变性的分析方法。

本发明涉及一种分析方法，其是利用分离分析方法来分析试样中的血红蛋白的方法，其包含在亚硫酸化合物及连二亚硫酸化合物中的至少一种的存在下分离血红蛋白。

在另一方式中，本发明涉及一种在本发明的分析方法中使用的分析用试剂盒，其包含含有亚硫酸化合物或连二亚硫酸化合物的组合物及记载了上述分析方法的说明书，所述组合物作为试样制备液、泳动液或流动相使用。

根据本发明，例如可发挥在抑制血红蛋白的变性的情况下进行血红蛋白的分离分析方法的效果。此外，根据本发明，优选可发挥通过抑制血红蛋白的变性从而能够进行准确的血红蛋白的分析的效果。另外，本发明可以是以人的治疗和诊断为目的的方式，也可以是不以人的治疗和诊断为目的的方式。

附图说明

图1A是表示可以用于本发明的方法的电泳芯片的一个例子的构成的示意图，图1B是沿图1A所示的电泳芯片的I-I线的剖面图。

图2是表示实施例1的结果的一个例子的图表。

图3是表示亚硫酸化合物及连二亚硫酸化合物的浓度与吸光度变化的关系的一个例子的图表。

具体实施方式

本发明基于以下认识：在血红蛋白的分离分析方法中，随着时间的经过、和/或分析条件逐渐变成酸性、血红蛋白逐渐被氧化(高铁血红蛋白化)、血红蛋白的吸收特性逐渐发生变化(极大波长415nm→405nm)，其结果是测定值有可能产生误差。进而，本发明基于以下认识：分离分析中的血红蛋白的变性可以通过使用亚硫酸化合物及连二亚硫酸化合物中的至少一种来抑制。即，本发明涉及一种分析方法(以下也称为“本发明的分析方法”。)，其是利用分离分析方法来分析试样中的血红蛋白的方法，其包含在亚硫酸化合物及连二亚硫酸化合物中的至少一种的存在下分离血红蛋白。根据本发明，例如可以发挥在抑制血红蛋白的变性的情况下进行血红蛋白的分离分析方法的效果。此外，根据本发明，优选可发挥通过抑制血红蛋白的变性从而进行准确的血红蛋白的分析的效果。

在亚硫酸化合物及连二亚硫酸化合物中的至少一种的存在下血红蛋白的变性得到抑制的详细机制并不清楚，但推测如下：对于分析中产生的氧化作用，亚硫酸化合物及连二亚硫酸化合物代替血红蛋白被氧化，从而作为防止血红蛋白的氧化的牺牲剂起作用。但是，本发明可以不被限定地解释为上述机制。

[分离分析方法]