[发明专利]嵌合体玉簪植株的组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种嵌合体玉簪植株的组培快繁方法。

背景技术

嵌合体是由不同遗传性状的细胞共同发育形成的同一个体或器官，细胞突变是嵌合体形成的基础。突变在任何一种植物中都会发生。植物嵌合体 (plant chimera)是指含有2种或者 2 种以上遗传型的植物组织或植物个体。Baur (1909)对黄边绿芯型天竺葵(Pelargonium zonale) 植物进行了详细的研究，发现其生长点原基 (shoot apical meristem,SAM)、茎秆、叶柄和叶均由2 种遗传型细胞有规律地组成, 遂称之为植物嵌合体。在此基础上，经进一步研究形成了植物嵌合体的基础理论，为植物嵌合体的应用及奇花异草的育种提供了依据。

玉簪（Hosta plantiginea Ascherson），又名玉春棒、白鹤仙、白萼，是一种优良的耐阴植物，既可观叶又可观花，同时，玉簪全株均可入药，花入药具有利湿、调经止带之功，根入药具有清热消肿、解毒止痛之功，叶能解毒消肿。玉簪的嵌和体包括绿芯、绿柄绿叶、深绿色、叶片全绿、大蓝花、小蓝花和绿边黄芯7个类型。

在繁殖手段方面，利用分株等诱导不同器官发生来获得嵌合体植株的稳定扩繁。目前，玉簪多用分株法进行繁殖，繁殖系数低，周期长，不能满足生产和市场的需要。研究玉簪的组培快繁能够满足商业化生产的大量需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种嵌合体玉簪植株的组培快繁方法，该方法繁殖系数高，适合商业化生产，填补了市场对嵌合体玉簪需求空白。

本发明的一种嵌合体玉簪植株的组培快繁方法，包括消毒、初代培养、继代培养、生根培养，利用嵌合体玉簪的幼芽为外植体进行组织培养及快速繁殖。

所述消毒的方法为：幼芽先用洗衣粉水浸泡10-15min并用软毛轻轻刷洗，再用流动清水冲洗30-45min， 75%酒精浸泡30-45s，0.1%升汞浸泡10-15min，不断搅拌，再用无菌水冲洗3-5次，用滤纸吸干，切成0.5-1cm³的方块，幼芽基部正向插入培养基中进行初代培养。

用玉簪幼芽作初代培养时，以MS为培养基，添加1mg/L—3.0mg/L6-BA和0.1mg/L—0.5mg/LNAA。

用诱导出的芽作继代培养时，以MS为培养基，添加0.5mg/L—2.0mg/L6-BA和0.1mg/L—0.3mg/LNAA。

用诱导出的大量丛芽进行扩大繁殖时，以MS为培养基，添加1mg/L—5mg/L6-BA和0.1mg/L—0.5mg/LNAA。

生根培养时将芽转接至：1/2MS—1/4MS培养基添加0.1mg/L—0.3mg/LNAA和0.5mg/L—1.0mg/L IBA以及0.1%—0.2%的活性炭；所述1/2MS—1/4MS指大量元素的量。

当试管苗的根长至2-3cm时，将其置于室温下炼苗1-2周，然后移栽到装有腐叶土和珍珠岩的穴盘中；一个月后根系长满穴盘，同时开始有新叶长出，苗健壮，生长势强，移栽成活率达95%以上。

本发明以嵌合体玉簪幼芽为外植体，研究了玉簪花的植株再生及快速繁殖技术。通过本发明完成植株再生、扩繁、生根、成苗的整个产业化过程并且培养基增殖系数高能够满足商业化生产的大量需求。

附图说明

图1、2为嵌合体玉簪初代培养结果图；

图3~5为增殖培养获得的丛生芽；

图6~8为生根培养结果图；

图9为工厂化育苗图；

图10~12为绿边黄芯嵌合体类型移栽成活苗。

具体实施方式

以下为本发明的具体实施方案，进一步描述本发明，但是本发明不仅限于此。

实施例1

（1）试验材料：取健壮、无病虫害的长为2—3厘米绿边黄芯嵌合体幼芽作为外植体。

（2） 无菌材料的获得：先用洗衣粉水浸泡10-15 min左右并用软毛轻轻洗，再用流动清水冲洗30-45 min，75%酒精浸泡30-45 s，0.1%升汞浸泡10-15min，不断搅拌，再用无菌水冲洗3-5次，用滤纸吸干，切成0.5-1cm³的方块，幼芽基部正向插入培养基中进行培养观察。