[发明专利]一种杉木组织培养方法

说明书

技术领域

    本发明涉及一种杉木组织培养方法。

背景技术

杉木（Cunninghamia lanceolata）是我国南方最重要的速生丰产树种，具有速生、丰产、材性好、用途广等优良特性，在我国人工林中具有重要的地位。由于杉木是异花授粉树种，用种子繁殖，个体分化大，难以保持杉木母体的性状；而采用常规的扦插、压条或嫁接等无性繁殖方法，繁育速度慢，难以满足日益增长的市场需求。组织培养方法是一种快速无性繁殖技术，选择杉木优良无性系材料，采用组织培养方法，既可以保持母体的优良性状，又可以有效节约生产成本。然而传统的组培过程中繁杂的技术环节，都是围绕防止污染而制定的，控制污染成了组培中的首要技术，是目前杉木组培苗价格偏高的主要原因。

众所周知，组培过程中的污染，主要表现为培养基的污染，营养丰富的培养基为细菌、真菌提供了适宜的滋生场所。因此，只要将培养基改造成即保证植物组织正常生长，又具有杀菌、抗菌功能的培养基，菌类一旦失去滋生场所，就不会对组培过程造成危害。植物开放式组织培养，是指在抑菌剂的作用下，使植物组织培养不需要严格无菌操作环境，不需要高压灭菌和超净工作台，在开放的有菌环境中进行植物的组织培养，从根本上简化组培环节，降低组培成本，达到真正的工厂化要求。本发明将开放式组织培养的方式应用到杉木上，旨在探索并建立一种“植物开放式组织培养”模式，从根本上简化杉木组培环节，降低组培成本，使杉木组织培养真正应用于生产，服务于农业，为实现组培产业化开辟一条新路。

发明内容

本发明的目的在于提供一种杉木组织培养方法，采用开放式组织培养的方式，从根本上简化杉木组培环节，降低组培成本，使杉木组织培养真正应用于生产。

本发明的杉木组织培养方法，采用开放式组织培养。

所述开放式组织培养采用的抑菌剂为菌杀保果、代森锰锌和次氯酸钠中的一种或几种。

所述抑菌剂为菌杀保果、代森锰锌和次氯酸钠的混合，组成为60～80mg.L^-1代森锰锌+60～65 mg.L^-1菌杀保果+3～7 mg.L^-1次氯酸钠。

所述抑菌剂为菌杀保果、代森锰锌和次氯酸钠的混合，组成为62.5mg.L^-1～78.13 mg.L^-1代森锰锌+60-65 mg.L^-1菌杀保果+3-7 mg.L^-1次氯酸钠。

在开放条件下配制培养基，加入抑菌剂，不经过高压灭菌，待培养基凝固后，即可接种。

本文明的方法，在不影响组培效果的同时，能够将污染率降低到可接受的范围，在抑菌剂的作用下，使杉木组织培养脱离严格无菌的操作环境，在自然、开放的有菌环境中进行植物的组织培养，从根本上简化组培环节，降低组培成本。

具体实施方式

在开放条件配制培养基，加入抑菌剂，但不经过高压。待培养基凝固后，即可接种。

在杉木的开放式组培过程中，在加有抑菌剂的培养基上生长的组培苗的株高、鲜重、干重、生根数、根长、叶绿素荧光参数为衡量指标，进一步评价杉木开放式组培方法，得到如下结论： 

（1）直接从商店购回代森锰锌、菌杀保果和次氯酸钠分别配制成所需的浓度的水溶液。62.5mg.L^-1～78.13 mg.L^-1代森锰锌+60～80 mg.L^-1菌杀保果+3～6 mg.L^-1次氯酸钠一种或组合，具有较好的抑菌效果，组合的污染率仅为3.4%（见表1），最大污染率不超过7%。

（2）与经过严格高压后的培养基，接种杉木苗的对照相比（见表2），在相同的培养室内，其污染率相当，但是没有加入抑菌剂的培养基，接种杉木苗后，其污染率则达到了76.7%。同时，该抑菌剂对杉木组培苗生长、叶绿素的合成、苗木光合作用的能力影响很小，其差异没有达到显著水平。

表1   开放式条件下接苗的污染情况统计

表2 不同试验抑菌剂组合配方