[发明专利]苦豆籽粕-双歧杆菌合生元研制方法

权利要求书

1.苦豆籽粕-双歧杆菌合生元研制方法，其特征是：

(1)、将耐氧驯化后的两歧双歧杆菌冻干菌粉按3％-5％的比例加入到优化TPY液体培养基中活化，培养20h-40h，是活化的第一代，将培养好的第一代菌液吹打混匀，从中吸取占新优化TPY液体培养基体积5％的菌液，接到新优化TPY液体培养基中培养20h-40h，是活化的第二代，将培养好的第二代菌液吹打混匀，从中吸取占新优化TPY液体培养基体积5％的菌液，接到新优化TPY液体培养基中培养20h-40h，是活化的第三代，优化TPY液体培养基配方比例为：每100g优化TPY液体培养基中含有胰蛋白胨0.5g-3g、大豆蛋白胨0.5g-2g、葡萄糖0.5g-2g、乳糖0.5g-1.5g、酵母粉0.5g-2g、氯化镁0.03g-0.08g、氯化钠0.5g-1g、磷酸氢二钠0.5g-1g、磷酸二氢钾0.1g-0.2g、吐温-80 0.05g-0.16g、硫酸亚铁0.001g-0.002g、L-半胱氨酸盐酸盐0.02g-0.1g、水85-99g；

(2)、将上述经活化了的第三代菌液用3000rpm-6000rpm/min、2℃-8℃的离心机离心10min-30min，收集菌泥，在收集好的菌泥中加入浓度为6％-10％的脱脂奶粉保护剂中乳化8min-15min，脱脂奶粉的加入量为上述第三代菌液体积的40％-60％，然后与已高压蒸汽灭菌浓度为4％-6％的海藻酸钠混合，制备成菌悬液，海藻酸钠的加入量为上述第三代菌液体积的40％-60％，再用实验室自制微胶囊生成器通过挤压法制得双歧杆菌微胶囊，挤压滴入浓度为1％-3％的CaCl₂溶液中，同时以120rpm-180rpm/min的速度不停的搅拌，静置20min-40min将滴入的菌悬液固化；

(3)、将上述固化好的菌悬液用生理盐水清洗过滤2次-5次，真空冷冻干燥24h-72h得双歧杆菌微胶囊；

(4)、再使用中药制粒机在双歧杆菌微胶囊最外层包被浓度为4％-8％的苦豆籽粕，得到苦豆籽粕-双歧杆菌合生元颗粒剂，苦豆籽粕与已包被微胶囊化后的双歧杆菌的质量比为1000g-1200g∶100g。