[发明专利]重组人干扰素β-1a的纯化方法有效
| 申请号： | 201110136296.6 | 申请日： | 2011-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN102219848A | 公开（公告）日： | 2011-10-19 |
| 发明（设计）人： | 应跃斌;王海彬;运雪莲;潘晨晓;杨承刚;白骅 | 申请（专利权）人： | 浙江海正药业股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/565 | 分类号： | C07K14/565;C07K1/22;C07K1/18 |
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| 地址： | 318000 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 干扰素 纯化 方法 | ||
1.一种重组人干扰素β-1a的纯化方法，其特征在于，所述的纯化方法包括一次亲和层析过程与随后的两次离子交换层析过程，其中两次离子交换层析过程中，先进行强阴离子交换层析然后再进行弱阳离子交换层析。
2.根据权利要求1所述的重组人干扰素β-1a的纯化方法，包括：
1)亲和层析：细胞上清液浓缩处理后，平衡亲和层析柱后上样，再用洗脱液洗脱层析柱，收集洗脱峰；浓缩亲和层析收集液并置换缓冲液；
2)强阴离子交换层析：平衡阴离子层析柱；将上步的收集液上样，收集含有重组人干扰素β-1a的流穿组份；
3)弱阳离子交换层析：平衡阳离子层析柱；将收集的阳离子层析柱流穿组分上样；用洗脱液洗脱层析柱，收集含有重组人干扰素β-1a的组分。
3.根据权利要求1或2所述的纯化方法，其特征在于，亲和层析过程中所用的亲和层析柱选自Blue染料亲和层析柱以及抗体亲和层析柱之一。
4.根据权利要求1或2所述的纯化方法，其特征在于，强阴离子交换层析过程中所用的强阴离子交换层析柱为阴离子交换柱Q-sepharose。
5.根据权利要求1或2所述的纯化方法，其特征在于，阳离子交换层析过程中所用的弱阳离子交换层析柱为阳离子交换柱CM-sepharose。
6.一种重组人干扰素β-1a的纯化方法，其特征在于，所述的纯化方法包括一次亲和层析过程与随后的两次离子交换层析过程，其中两次离子交换层析过程中，先进行弱阳离子交换层析然后再进行强阴离子交换层析。
7.根据权利要求6所述的重组人干扰素β-1a的纯化方法，包括：
1)亲和层析：细胞上清液浓缩处理后，平衡亲和层析柱后上样，再用洗脱液洗脱层析柱，收集洗脱峰；浓缩亲和层析柱收集液并置换缓冲液；
2)弱阳离子交换层析：平衡阳离子层析柱；将上步的收集液上样，洗脱液洗脱层析柱，收集含有重组人干扰素β-1a的组份；
3)强阴离子交换层析：平衡阴离子层析柱；将上步的收集液上样，并收集含有重组人干扰素β-1a的流穿组份。
8.根据权利要求6或7所述的纯化方法，其特征在于，亲和层析过程中所用的亲和层析柱选自Blue染料亲和层析柱以及抗体亲和层析柱之一。
9.根据权利要求6或7所述的纯化方法，其特征在于，强阴离子交换层析过程中所用的强阴离子交换层析柱为阴离子交换柱Q-sepharose。
10.根据权利要求6或7所述的纯化方法，其特征在于，弱阳离子交换层析过程中所用的弱阳离子交换层析柱为阳离子交换柱CM-sepharose。
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