[发明专利]再生细胞用于促进伤口愈合的应用

说明书

本申请是原申请的申请日为2004年7月1日，申请号为200480043510.1，发明名称为《使用再生细胞促进伤口愈合的方法》的中国专利申请的分案申请。

相关申请

本申请是以下的部分延续申请：要求2001年12月7日提出的美国临时申请No.60/338,856的权利的美国申请No.10/316,127，2002年12月9日提出，题目为SYSTEMS AND METHODS FOR TREATING PATIENTS WITHPROCESSED LIPOASPIRATE CELLS。所述申请的内容在此被特意地作为参考加以引入。

发明背景

技术领域

本发明整体上涉及多种组织来源的再生细胞，特别是脂肪来源的再生细胞(例如：干细胞和/或祖细胞)，使用脂肪来源的再生细胞的方法，含有脂肪来源的再生细胞的组合物，用于制造和使用脂肪来源的再生细胞的系统，其用于促进伤口愈合，例如糖尿病，慢性外周血管疾病和肥胖所引起的伤口。

背景技术

大约五百万美国人患有慢性疮口，原因经常是由于有限的血流能够减慢身体的自我愈合过程。通常，对皮肤的损伤引起一连串连锁反应，其最终导致伤口愈合，即新真皮形成和表皮细胞再生。这一系列反应包括局部、区域和系统的生长因子、细胞因子、和细胞参与者(cellular participant)，包括间充质干细胞。但是，不充分和/或不彻底的伤口愈合会引起严重的个体病态，包括生活质量的极度下降。疮口能变得感染，坏疽，有时需要截肢。例如，由于不充分的伤口愈合而进行的非创伤性截肢的一个主要原因是糖尿病。在美国有近1600万糖尿病人。每年，超过67000的糖尿病人需要外科手术截肢，不得不进行长期和高价的复原。对于许多人，活动和自理受到影响，永久地改变了他们的生活质量。更甚者，不良的伤口愈合可能成为死亡的根源。

对于患有有难以愈合的慢性伤口的病人，基本的药物和外科手术护理是必须的，但这些是不够的。目前对于伤口愈合的治疗包括非健康组织的切取，使用生长因子，高压(高压力)氧治疗，高级伤口敷料，抗生素治疗，常规的伤口敷料，营养学建议，教育/预防，外科手术和物理疗法。例如，单一或多参与分子联合的操作，包括但不限于PDGF-BB和bFGF，可以用来加强自发的伤口愈合。另外，还可以使用“工程设计的(engineered)”细胞产物(和)，作为引起生长因子表达的另一种生理模式的途径。已经证明，使用如Regranex，一种血小板来源的刺激愈合的生长因子的治疗，对于合适病人的伤口护理是有益的。

与上述单一或联合的分子治疗相比，再生细胞的方法也享有相对的成功。在临床的目标方式中，再生药物控制干细胞(即，身体非特定性的主要细胞)的不定性自我更新并发育成为成熟的特定细胞的能力。但是，再生细胞治疗的广泛应用受到细胞保存和与大量体外处理有关的高费用问题的阻碍。然而，虽然已经表明干细胞群存在于一种以上的骨髓，皮肤，肌肉，肝和脑中(Jiang等人，2002b；Alison，1998；Crosby和Strain，2001)，但是它们在这些组织中的分布频率是很低的。例如，间充质干细胞在骨髓中的分布频率估计在1/100,000与有核细胞的1/1,000,000之间(D′Ippolito等人，1999；Banff等人，2001；Falla等人.1993)。相似地，从皮肤中提取成体干细胞(ASC)涉及一系列复杂的要花费几周时间的细胞培养步骤(Toma等人，2001)，并且骨骼肌肉干细胞的临床应用需要2到3周的培养阶段(Hagege等人，2003)。因此，已知的任何来自这样的组织的干细胞的临床应用，都需要通过细胞纯化和细胞培养过程来提高细胞数量、纯度和成熟度。

虽然细胞培养提高了细胞数量、纯度和成熟度，但也提高了成本。该成本可能包括一种以上以下的技术困难：由于细胞老化引起的细胞功能丧失，潜在有益的非干细胞群的丢失，细胞对病人的潜在应用的延迟，增加了资金成本，增加了细胞被环境微生物污染的风险。近来调查骨髓ASC治疗效果的研究在本质上使用全骨髓来避开与细胞培养有关的问题(Horwitz等人，2001；Orlic等人，2001；Stamm等人，2003；Strauer等人，2002)。但是，临床疗效并不理想，结果很可能与骨髓中有限的ASC剂量和可利用的固有纯度有关。