[发明专利]以粘蛋白1和生存素为靶点的肿瘤基因工程疫苗有效
申请号: | 201110086366.1 | 申请日: | 2011-04-07 |
公开(公告)号: | CN102732543A | 公开(公告)日: | 2012-10-17 |
发明(设计)人: | 孔维;张海红;于湘晖;于永慧;王玉倩;张丽星 | 申请(专利权)人: | 长春百克生物科技股份公司;吉林大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;A61K48/00;A61K38/17;A61P35/00 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 | 代理人: | 张广育;姜建成 |
地址: | 130012 吉林省*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白 生存 肿瘤 基因工程 疫苗 | ||
1.一种重组质粒CpVR-MS,其特征在于所述重组质粒的骨架载体为VR-MS,在所述VR-MS的非编码区插入CpG motif序列,优选地,其中非编码区中的插入位点为Stu1位点。
2.一种双顺反子表达载体DV,其特征在于所述表达载体的骨架载体为VR1012,在所述VR1012多克隆酶切位点插入了BGH、CMV-intron A序列,使其在VR1012本身的第一表达框架之外,含有一个第二表达框架;优选地,其中所述表达框架中的第一表达框架的多克隆位点包括Pst1、Sal1、not1、Xba1、Nhe1、BamH1,第二表达框架的多克隆酶切位点包括Bgl2、Apa1、EcoR1。
3.一种带有CpG motif的双顺反子表达载体CpDV,其特征在于所述表达载体的骨架载体为权利要求2所述的DV,在所述DV的非编码区插入CpG motif序列;优选地,其中非编码区中的插入位点为Stu1位点。
4.一种重组质粒CpDV-IL2-MS,其特征在于所述重组质粒的骨架载体为权利要求3所述的CpDV,在所述CpDV的第一表达框的多克隆位点插入IL-2序列,在所述CpDV的第二表达框的多克隆位点插入MS序列;优选地,其中第一表达框的插入多克隆位点为BamH1,第二个表达框的插入多克隆位点为Bgl2。
5.一种重组质粒pRSET B-9M,其特征在于在pRSET B原核表达载体的多克隆位点中插入一个含有9个拷贝的MUC1VNTR的序列9M;优选地,其中所述插入多克隆位点为BamH I/EcoRI。
6.一种重组质粒pRSET B-S8,其特征在于在pRSET B原核表达载体的多克隆位点中插入一个SEQ ID NO:8所述的序列S8;优选地,其中所述插入多克隆位点为BamH I/EcoR I。
7.一种疫苗组合物,包括权利要求1的重组质粒CpVR-MS;优选地,还包括免疫佐剂;更优选地,其中所述免疫佐剂选自细胞因子白介素2(IL-2)、细胞因子粒-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)和非甲基化的CpG基序免疫刺激DNA序列。
8.一种疫苗组合物,包括权利要求4的重组质粒CpDV-IL2-MS;优选地,还包括免疫佐剂;更优选地,其中所述免疫佐剂选自细胞因子白介素2(IL-2)、细胞因子粒-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)和非甲基化的CpG基序免疫刺激DNA序列。
9.一种疫苗组合物,包括S8蛋白和/或9M蛋白;优选地,还包括免疫佐剂;更优选地,其中所述的免疫佐剂选自DDA、MPL、AD11SM。
10.权利要求1所述的重组质粒、权利要求4所述的重组质粒或者S8蛋白和/或9M蛋白在制备用于治疗肿瘤的疫苗中的用途;优选地,其中所述疫苗还包含化疗药物;更优选地,其中所述化疗药物选自卡铂、顺铂、奥沙利铂和紫杉醇。
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