[发明专利]一种肝素钠的蛋白酶水解工艺

说明书

技术领域

 本发明的主要任务在于提供一种肝素钠的蛋白酶水解工艺，具体是一种由蛋白酶水解蛋白质进行肝素钠的水解获得肝素钠的肝素钠的蛋白酶水解工艺。

背景技术

肝素钠是一种由动物结缔组织的肥大细胞产生的粘多糖,是一种天然抗凝血物质,它在抗凝血,促进脂蛋白酶释放和补体溶细胞体系等方面具有活性,被广泛用于治疗血栓塞、暴发性流脑、败血症、肾炎、急性心肌梗塞、动脉硬化等疾病,还具有澄清血浆脂质,降低胆固醇等作用。在机体内它与蛋白质结合成复合物存在于肥大细胞中, 可被蛋白酶解离出来，因此，目前的动物小肠内的肝素钠一般都是采用蛋白酶水解工艺制作，但是，由于简单的水解工艺制得的肝素钠速度慢、提取率低，该技术有待进一步地提升。

发明内容

本发明主要任务是提供一种肝素钠的蛋白酶水解工艺，具体是一种提取率高、提取速度快的肝素钠的蛋白酶水解工艺。

   为了解决以上技术问题，本发明的一种肝素钠的蛋白酶水解工艺，主要由蛋白酶水解蛋白质进行肝素钠的水解，其特征在于：在蛋白酶水解蛋白质进行肝素钠的水解过程中，同时辅助超声波，且在小肠粘膜处理阶段控制其含盐量为小肠粘膜质量的2.5-4%。

进一步地，超声波的波长在25Hz，功率密度0.5-0.7 W/cm²的超声波，在酶解的首尾各介入一次次，每次处理0.5h。  

本发明的优点在于：由于食盐可促进脂肪的分解,对蛋白质的分解具有抑制作用，因此在肝素钠的提取上，不宜过量使用食盐。但是目前普遍存在提取肝素钠超量使用食盐的现象，主要是因为食盐量的增加会加快肝素钠的提取速度，缺点是原料浪费大、废水污染严重，由于没有找到合适的即能提高生产效率，又能环保、高效且提高收率的方法，因此，一直被延续。

本发明主要是采用超声波的介入，用超声波作用于液体介质时除产生空化作用、热效应、并赋予液体分子动量外,还加速传质和传热的速率，对溶质的溶解度及溶解速度产生的影响，提高肝素钠的收率及弥补本发明盐度较低降低生产效率的缺陷。实现了高收率、高效且绿色环保，减少废水排放的生产方式。

具体实施方式

实施例1

   选取含盐度为4度的猪小肠粘膜液500g，加入NAOH，调其pH值为9，搅拌升温至55℃，保温30分钟后，按小肠粘膜：碱性蛋白酶重量比为500：0.1加入碱性蛋白酶，保温2小时，在加入碱性蛋白酶后，介入超声波，具体为：超声波的波长在25Hz，功率密度0.5-0.7 W/cm²的超声波，在酶解的首尾各介入一次，每次处理0.5h。酶解后是常规的树脂吸附、洗脱、醇淀、烘干得收率为90%,效价为105U/mg的肝素钠，且在该生产中，由于减少了NaCl的用量，其废水量每处理1T小肠减少200 g，实现了高效、高收率、环保的生产目的。

实施例2

   在1000升的反应釜中抽含盐度为3.5度的200付猪小肠粘膜和水，猪小肠和水的重量比为3:1，加入NAOH，调其pH值为9，搅拌升温至55℃，保温30分钟后，按小肠粘膜：碱性蛋白酶重量比为500g：0.1加入碱性蛋白酶，保温2小时，在加入碱性蛋白酶后，介入超声波，具体为：超声波的波长在25Hz，功率密度0.5 W/cm²的超声波，在酶解的首尾各介入一次，每次处理0.5h。酶解后是常规的树脂吸附、洗脱、醇淀、烘干得收率为91%、效价为106U/mg的肝素钠，且在该生产中，由于减少了NaCl的用量，其废水量每处理1T小肠减少300g，实现了高效、高收率、环保的生产目的。