[发明专利]删除了高变区1的HCV包膜E2蛋白及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药工程技术领域，是一种删除了高变区1的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)包膜E2蛋白及其在丙型肝炎疫苗以及HCV感染免疫诊断试剂中的应用。

背景技术

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)属于黄病毒科，是经血液传播的急、慢性肝炎的主要致病因子之一。HCV为单股正链RNA病毒，只有一个开放阅读框架，编码一个约3010个氨基酸的蛋白前体，包括三种结构蛋白(核心蛋白Core、包膜蛋白E1、包膜蛋白E2)和七种非结构蛋白(p7蛋白、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)(图1)(参见文献：Reed KE，Rice CM.Overviewof hepatitis C virus genome structure，polyprotein processing，and protein properties.Curr Top Microbiol Immunol.2000；242：55-84.)。NS5B为RNA依赖的RNA聚合酶，在指导RNA合成的过程中无校正功能，使得HCV基因组变异性很高，根据其基因组核苷酸序列的差异，目前将HCV分为六个基因型。目前全球HCV感染者超过1.7亿，约80％的急性HCV感染会发展为慢性感染。HCV慢性感染可导致肝硬化、肝细胞癌等终末期肝病，还与多种肝外疾病，如淋巴瘤、混合性冷球蛋白血症、肾小球肾炎、迟发性皮肤卟啉症、糖尿病等密切相关。虽然已经有免疫学和核酸检测方法，但这些方法均不能完全排除假阴性，此外，感染的“窗口期”由于抗体水平低以及病毒复制水平低，更容易造成漏检。治疗方面，目前的标准疗法是联合使用利巴韦林和聚乙二醇修饰的干扰素(IFN-α)，不同基因型HCV对该疗法的敏感性有很大差异，I型HCV感染对该疗法的持久应答率仅为50％。虽然全球范围内经过血液以及血制品途径感染的丙型肝炎病例与上世纪九十年代以前相比有大幅下降，但在发展中国家血液和血制品仍然是传播HCV的重要途径。此外，每年散发性以及传播途径不明的丙型肝炎新发病例在全球范围内仍高居不下。控制HCV感染的关键措施还是依赖于开发出有效的疫苗，从1989年HCV基因组被克隆以来，丙型肝炎疫苗的研究在欧美和日本等发达国家一直是研究热点，但迄今未有有效的疫苗问世。