[发明专利]用人工转录因子诱导产生多能干细胞

权利要求书

1.一种融合蛋白，其特征在于，该融合蛋白含有细胞全能性相关的基因编码的蛋白或其片段和转录调控结构域或其具有转录调控活性的片段。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述细胞全能性相关的基因选自OCT4、NANOG、SOX2、Tcl1、Tcf3、Rex1、Sal4、lefty1、Dppa2、Dppa4、Dppa5、Nr5a1、Nr5a2、Dax1、Esrrb、Utf1、Tbx3、Grb2、Tel1、Sox15、Gdf3、Ecat1、Ecat8、Fbxo15、eRas或Foxd3。

3.如权利要求1-2中任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述细胞全能性相关的基因选自Oct4、NANOG、SOX2。

4.如权利要求1-3中任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述细胞全能性相关的基因编码的蛋白选自Oct4第127-352位氨基酸序列或Oct4第1-286位氨基酸。

5.如权利要求1-4中任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述转录调控结构域选自病毒蛋白的VP16、EBNA2、E1A的转录调控结构域或其具有转录调控活性的片段，或者选自酵母的Gal4、Oaf1、Leu3、Rtg3、Pho4、Gln3、Gcn4、Gli3、Pip2、Pdr1、Pdr3、Lac9、Tea1的转录调控结构域或具有转录调控活性的片段，或者选自哺乳动物的p53、NFAT、Sp1(如Sp1a)、AP-2(如Ap-2a)、Sox2、NF-κB、MLL/ALL、E2A、CREB、ATF、FOS/JUN、HSF1、KLF2、NF-IL6、ESX、Oct1、Oct2、SMAD、CTF、HOX、Sox2、Sox4或Nanog的转录调控结构域或其具有转录调控活性的片段，或者选自植物HSF的转录调控结构域或其具有转录调控活性的片段。

6.如权利要求1-5中任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述转录调控结构域选自病毒蛋白的VP16的转录调控结构域或其具有转录调控活性的片段，或者选自酵母的Gal4的转录调控结构域或其具有转录调控活性的片段，或者选自哺乳动物的p53、Sp1a、Ap-2a、Sox2、NF-κB或Nanog的转录调控结构域或其具有转录调控活性的片段。

7.如权利要求1-6中任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述转录调控结构域选自：VP16第446-490位氨基酸序列、VP16第437-448位氨基酸序列、酵母Gal4第768-881位氨基酸序列、人NFκB第451-551位氨基酸、小鼠p53第8-32位氨基酸序列、人Sp1a第139-250位氨基酸序列、人Ap-2a第31-117位氨基酸序列、小鼠Sox2第121-319位氨基酸序列和小鼠Nanog第244-305位氨基酸序列。

8.如权利要求1-7中任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白含有一个或多个相同或不同的转录调控结构域。

9.如权利要求1-8中任一项所示的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白选自：SEQ ID NO：74-76和92-106所示的氨基酸序列。

10.一种核苷酸序列，其特征在于，该核苷酸序列编码权利要求1-9任一项所述的融合蛋白。

11.如权利要求10所述的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列选自SEQ ID NO：71、SEQ ID NO：72、SEQ ID NO：73和SEQ ID NO：77-91。

12.一种表达载体，其特征在于，该表达载体含有权利要求10-11中任一项所述的核苷酸序列。

13.一种组合物，其特征在于，该组合物含有权利要求1-9任一项所述的融合蛋白、权利要求10-11中任一项所述的核苷酸序列或权利要求12所述的表达载体，和运载体或赋形剂。