[发明专利]一种固定化酶合成L-色氨酸的方法无效
申请号: | 201110007890.5 | 申请日: | 2011-01-14 |
公开(公告)号: | CN102140483A | 公开(公告)日: | 2011-08-03 |
发明(设计)人: | 张奇;白钢;侯洁;白芳;段静静 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
主分类号: | C12P13/22 | 分类号: | C12P13/22 |
代理公司: | 天津佳盟知识产权代理有限公司 12002 | 代理人: | 侯力 |
地址: | 300071*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 固定 合成 色氨酸 方法 | ||
1.一种固定化酶合成L-色氨酸的方法,其特征在于该方法包括:
将色氨酸酶进行固定化,获得固定化酶,以固定化酶为酶源,以L-半胱氨酸和吲哚为底物,以磷酸吡哆醛为辅酶,在35至55℃下,pH值为6至11,经酶法转化反应1至5h,产生L-色氨酸,进一步分离获得L-色氨酸。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:固定化酶载体为GE、ES-2、0404-2树脂。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述的固定化酶载体优选为GE树脂。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:在每升催化反应液中,固定化酶的加入量为5至50 mL,底物L-半胱氨酸和吲哚按质量比1:1加入,分别为2至25 g,辅酶磷酸吡哆醛的量为0.05 g至0.25 g。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:优选转化温度为45℃;优选转化pH值为8.5;优选转化时间为3 h。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:每升反应液中,固定化酶优选用量为20 mL;底物L-半胱氨酸和吲哚的用量优选分别为10 g;辅酶磷酸吡哆醛的优选用量为0.15 g。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:固定化酶可重复使用10次,且在最佳的反应条件和体系下,前5次使用,其催化底物转化率均可达80%以上。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:L-色氨酸的纯化方法是,调节催化反应上清液pH至5.0,采用S-8型大孔树脂去除其中残留的吲哚,再采用NKA-Ⅱ型大孔树脂吸附L-色氨酸,经50 v/v %乙醇洗脱、减压浓缩干燥,获得L-色氨酸。
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