[发明专利]植物样品中果胶含量的测定方法

权利要求书

1.一种植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)在植物样品中加入酸性醇溶液，随后在水浴中加热回流，再进行一次过滤；

2)将一次过滤得到的滤渣用酸溶液浸泡，并在水浴中加热回流，再进行二次过滤，冷却后定容，得到滤液待用；

3)往二次过滤后的滤渣加入乙酸/乙酸钠缓冲溶液处理，再加入果胶酶溶液，在水浴中加热振荡，然后进行三次过滤，得到滤液待用；

4)将步骤2)中得到的滤液依次加入乙酸/乙酸钠缓冲溶液、果胶酶溶液，然后在水浴中加热振荡，得到酶解液，在酶解液中合并步骤3)得到的滤液，定容，得到待测液；

5)将待测液吸入到连续流动分析仪中，所述待测液与吸入到连续流动分析仪中的强酸性分解试剂反应，分解成糠醛碱的衍生物，而后与加入的显色剂反应显色，在490nm～540nm波长下进行检测。

2.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤1)中，以体积百分比计，酸性醇溶液的醇浓度为60％～80％；而氢离子浓度为0.005mol/L～0.02mol/L，酸性醇溶液加入量为：1克样品加入约50mL～200mL酸性醇溶液。

3.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤1)中，所述水浴中加热回流的温度为：80℃～100℃，时间为10分钟～1小时。

4.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤2)中，所述酸溶液是浓度为0.05mol/L～0.1mol/L的盐酸，水浴中加热回流的温度为：80℃～100℃，时间为30分钟～2小时，对于1克植物样品，定容后滤液体积控制在200mL～250mL。

5.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤3)中，乙酸/乙酸钠缓冲液和果胶酶溶液加入量为：1克植物样品，加入缓冲液15mL～20mL、加入果胶酶溶液1mL～2mL，其中，每毫升果胶酶溶液的酶活性300个酶活力单位以上；所述水浴中加热振荡的温度为：40℃～60℃，时间为1小时～2小时。

6.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤4)中，1mL滤液中加入缓冲液15～20mL、加入果胶酶溶液1～2mL，其中，每毫升果胶酶溶液的酶活性为300个酶活力单位以上，所述水浴中加热振荡的温度为：40℃～60℃，时间为1小时～2小时。

7.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤5)中将待测液与强酸性分解试剂通过螺旋管混合，在待测液与强酸性分解试剂反应过程中加热，而后冷却。

8.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，所述植物样品为粉末状。

9.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤1)中，所述植物样品体积较大时，加入酸性醇溶液后先搅拌成桨，再进行水浴加热回流。

10.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，所述显色剂为对羟基联苯溶液，所述对羟基联苯溶液中的各组分配比为：1000mL蒸馏水中溶解300～500mg对羟基联苯及3g～5g氢氧化钠。

11.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，所述强酸性分解试剂为含有四硼酸钠的浓硫酸溶液，其中，四硼酸钠与浓硫酸的配比为：1000mL浓度为92％～99％的浓硫酸中溶解3g～6g的四硼酸钠。

12.根据权利要求7所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，在待测液与强酸性分解试剂反应过程中加热的温度为90℃～99℃。

13.根据权利要求7所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，冷却采用匝数为20匝～50匝的冷却管冷却。

14.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，以体积百分比计，步骤3)、步骤4)中的果胶酶溶液的浓度为300u/mL～600u/mL。