[发明专利]微流体装置的再生

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2009年11月30日提交的美国临时专利申请No.61/265,325的优先权，其通过引用全文并入本文。

背景技术

微流体装置为核酸分析领域(尤其是包括核酸扩增的分析领域)带来了一场革命。适当设计的装置可用作分析工具来测定特定的目的靶核酸在样品中是否存在、检测或表征与疾病或遗传异常相关联的等位基因、进行基因分型分析和基因表达分析、用于核酸测序以及其他应用。在一个实施方案中，可以以制备性方式使用所述装置，以扩增出足以用于进一步分析的核酸。

可通过设计可重复使用的微流体装置尤其是可重复使用的基于弹性体的微流体装置来降低分析成本。然而，重复使用这样的装置有许多障碍。局限性之一与核酸分析的灵敏度相关，其中单个核酸分子也可被检测到。这样，来自上一轮分析的即便微小量的污染也可使被重新使用的装置不可靠。

附图简述

图1是显示可重复使用的微流体芯片中选定的室、通道和阀的示意图。

图2是概述再生的微流体芯片之应用的流程图。“NAI溶液”是“核酸失活溶液(nucleic acid inactivating solution)”。

图3A～D显示简化的示意图，其显示本发明一个实施方案的操作过程中通过微流体装置的流体流。

图4显示实验结果，其中在两个装置的每一个中先后进行6个PCR扩增，在扩增之间再生所述装置。在每次反应中，按照下文实施例中的描述用阳性对照和阴性对照对微流体装置进行上样。获得实时PCR的热图，以评价在再生之后装置的可靠性。显示了Ct和Ct的标准差。第二列中显示第一芯片的结果，且第三列中显示第二芯片的结果。

图5是从美国专利No.7,476,363修改而来的示意图，显示可重复使用的微流体芯片中选定的室、通道和阀。

图6是从美国专利No.7,476,363修改而来的示意图，显示可重复使用的微流体芯片中选定的室、通道和阀。

图7是从美国专利公开No.2008/0223721修改而来的示意图，显示可重复使用的微流体芯片中选定的室、通道和阀。

图8是从美国专利No.7,476,363修改而来的示意图，显示可重复使用的微流体芯片中选定的室、通道和阀。

图9是本发明一个实施方案的载体和微流体装置的简化透视图。

图10A～D图示用于均匀计量泵送(uniform meter pumping)的方法。

图10A：膨胀泵送（Dilation Pumping)；图10B：单侧膨胀泵送(Single Sided Dilation Pumping)；图10CB：蠕动泵送(Peristaltic Pumping)；图10D：限流阻碍物泵送(Limiting Resistor pumping)。

这些图表仅是代表性的，并不意在限制本发明的范围。要理解的是，图中所示的示例性流体回路不一定包括了工作装置中所使用的所有阀。根据所选择的具体构造，工作装置所使用的阀可以比所示的更少。

发明内容

在一个方面中，本发明提供用于使微流体装置适于在核酸分析中重复使用的方法，所述方法通过a)通过泵送使核酸失活溶液流入所述装置的微流体通道；并且随后b)通过泵送使清洗溶液流入所述通道从而置换所述通道中的所述核酸失活溶液，由此使来自之前使用所述装置的任何残留核酸失活。在一个实施方案中，所述微流体装置包含多个微流体反应室，其各自与所述微流体通道流体连接。在一个实施方案中，所述微流体反应室包含来自之前使用所述装置的残留核酸。