[发明专利]冷冻方法

说明书

技术领域

本发明涉及冷冻方法。更具体地讲，涉及在存在磁场的情况下，以非破坏状态对食品、脏器等进行冷冻的方法。

背景技术

作为能够抑制对食品等进行冷冻保存时的水分分离和组织破坏，从而在不损害食品的鲜度和味道的情况下进行冷冻的方法，提出过利用磁共振的方法(日本特开2000-325062号公报)。该方法包括如下步骤：对配置于静磁场内的食品等被冷冻物连续地或者间歇地照射规定频率的电磁波，使构成被冷冻物中含有的水分子的氢原子核产生磁共振，使水分的结冰温度下降，从而以通常情况以下的结冰温度进行急速冷冻。由于该方法能够实现不产生细胞破坏的冷冻，所以作为能够融解并重现未损害冷冻前的食品的味觉和味道的食品的方法而得到关注（以下，在本说明书中有时将该冷冻方法称为“磁共振冷冻方法”）。关于能够用于该磁共振冷冻方法的装置等，例如在国际公开WO 01/24647、日本特开2003-139460号公报或者日本特开2004-81133号公报等中有所记载。另外，已揭示了实现如下方法的可能性：通过在食蟹猿的卵巢冷冻中使用磁共振冷冻方法，能够在不破坏细胞的状态下长期地对卵巢进行冷冻保存（山海，第25回日本受精着床学会总会，2007年8月31日）。

磁共振冷冻方法是这样的方法：通过在磁场内冷却对象物而以良好的再现性创造出过冷却状态，并以极短的时间完成此后的从开始冷凝到完全冷凝为止的过程，由此来抑制冷冻过程中的对象物中的细胞破坏。该方法包括如下步骤：向与一般为100Hz以下的交流电源（典型为50Hz或者60Hz的商用交流电源）连接的线圈流入交流电，在线圈中央部形成与交流频率对应的频率的变化磁场，在该磁场内进行对象物的冷却。然而以往，并没有充分理解由交流电形成的变化磁场与过冷却状态之间的关系，尤其是完全没有理解磁场频率与过冷却状态之间的关联。

【现有技术文献】

【专利文献】

【专利文献1】日本特开2000-325062号公报

【特许文献2】国际公开WO 01/24647

【专利文献3】日本特开2003-139460号公报

【专利文献4】日本特开2004-81133号公报

【非专利文献】

【非专利文献1】第25回日本受精着床学会总会,Organon Sponsored Special Symposium,Cryopreservation and Transplantation of Ovarian Tissue,A Novel Method for Cryopreservation of Ovarian Tissue in Cynomolgus Monkeys,2007年8月31日,http://jsfi2007.umin.jp/program.html

发明内容

发明要解决的课题

本发明的课题是提供一种在存在磁场的情况下以非破坏状态对食品、脏器等对象物进行冷冻的方法。更具体地讲，本发明的课题是提供一种与现有的磁共振冷冻方法相比，对象物的破坏（例如细胞破坏等）更少的冷冻方法。

用于解决课题的手段

本发明人为了解决上述课题而进行了深刻研究的结果是，发现了如下情况：在磁共振冷冻方法中，通过使磁场频率比以往的频率(100Hz以下)高，能够改善冷凝开始前的过冷度，并且，通过使磁场频率成为2000Hz左右，能够达到极高的过冷度，能够大幅缩短从冷凝开始到结束为止的时间，以非破坏状态对对象物进行冷冻。本发明正是基于上述认识而完成的。

即，本发明提供了一种磁共振冷冻方法，该方法包括在磁场内冷却对象物的步骤，其中，磁场频率为200Hz以上。

根据本发明的优选方式，提供如下各种方式的上述磁共振冷冻方法，所述各种方式有：磁场频率为1000Hz～10000Hz；磁场强度为0.01mT～0.4mT，优选为0.2mT；在-2℃以下且-40℃以上的范围的温度下进行冷冻：按照每分钟温度下降0.1℃～1.0℃的方式进行上述冷冻。

根据更优选的方式，提供如下各种方式的上述磁共振冷冻方法，所述各种方式有：对象物为食品；对象物为生物个体、或者从活体分离出的脏器或组织；对象物为细胞；对象物为核酸或者蛋白质。

另外，根据其他观点，提供一种使用对从手术中的患者分离/采集的组织进行冷冻而调制出的标本在手术中进行病理诊断的方法，其中，该方法包含利用上述磁共振冷冻方法进行冷冻的步骤。

发明效果