[发明专利]包含聚γ谷氨酸-壳聚糖纳米颗粒的佐剂组合物

说明书

技术领域

本发明涉及包含聚γ谷氨酸-壳聚糖纳米颗粒的佐剂组合物以及包含所述佐剂组合物的疫苗组合物，更具体地，本发明涉及包含借助壳聚糖和有安全保证的聚γ谷氨酸之间的离子键合制备的纳米颗粒的佐剂组合物，以及包含所述聚γ谷氨酸-壳聚糖纳米颗粒和抗原的疫苗组合物。

背景技术

佐剂是可以用于产生抗原性增加的疫苗或者用于通过增加对抗原的非特异性免疫反应而达到治疗和预防目的的材料。由于抗原水平低时，佐剂用来在较长时间内维持针对抗原的强烈且快速的免疫反应，这些佐剂可以用于疫苗制备。此外，佐剂使得能够使用特殊抗原或者能够改变抗原水平，从而调节针对抗原的免疫反应或者控制针对抗原的抗体类型和亚类。此外，佐剂可以用以增强免疫反应，特别是对免疫不成熟或衰老的人，提高粘膜免疫性的诱导。

大部分佐剂是通过反复实验而在许多天然材料中发现的。在1925年，世界范围内第一次对佐剂的报道中，Ramon(法国)报道，在食品中使用的木薯淀粉(Casaba)与白喉和破伤风类毒素混合，将有效地增加抗原特异性抗体的产生。从那时起，报道了铝佐剂的免疫增强作用，并开发了作为免疫调节剂的包含失活的灭活分枝杆菌的有效的乳液型佐剂。弗氏完全佐剂(FCA)被公认为非常有效的免疫调节剂，但是由于它的高反应原性，不适合人类使用。出于这个原因，英国开发并批准了不含分枝杆菌的弗氏不完全佐剂(FIA)。据报道，革兰氏阴性细菌内毒素具有免疫增强作用，1974年Ellouz等人证实了胞壁酰二肽(MDP)的作用(Ellouz F.et al.，Biochem.Biophys.Res.Coomun.59：1317-25，1974)。此后，有报道称卵磷脂、皂素及其类似物也可作为佐剂来增强免疫性。

理想的佐剂应具有免疫增强作用并且应该是无毒、高度生物可降解、易于使用、易于获得且廉价的。迄今为止，已经报道了许多类型的佐剂，但只有几种类型的佐剂可以实际用于临床实践。这是因为，在开发用于疫苗的佐剂时，安全性是最重要的，应该有可靠的研究数据予以支持。

疫苗有治疗和预防作用，可以使99％的疾病的发生率得以降低。因此，疫苗是具有较高性价比的药物。目前，疫苗的使用不仅仅局限于传染病，也正在扩展到各种难治的疾病，包括癌症和自身免疫疾病。此外，由于治疗性疫苗的出现，人们意识到发展疫苗是非常重要的。因此，佐剂作为疫苗相关产品的发展正与疫苗的发展一起得以促进。随着免疫相关疾病范围的扩展，人们意识到开发新型佐剂是很有前景的领域。

同时，本发明的发明人取得了有关高分子量聚γ-谷氨酸及其应用的专利(韩国专利登记号：399091)、关于使用枯草杆菌chungkookjang变种(Bacillus subtilis var.chungkookjang)—一种生产高分子量聚γ谷氨酸的耐盐性的菌株—生产聚γ-谷氨酸的方法专利(韩国专利登记号：500796)以及有关抗癌组合物、佐剂、免疫增强剂和病毒感染抑制的专利(韩国专利登记号：496606、517114、475406和0873179)。此外，本发明人报道了含有聚γ-谷氨酸的透明质酸酶抑制剂(韩国专利注册号582120)，并发现基于聚γ-谷氨酸的免疫增强作用的抗癌作用[Poo，H.R.et al.，Journal of Immunology，178：775，2007，Poo，H.R.et al.，Cancer Immunol Immunother(2009年3月18日在线出版)]。也就是说，本发明人进行了广泛的研究以开发聚γ-谷氨酸的应用，包括聚γ-谷氨酸的医药用途，从而找到了聚γ-谷氨酸的各种效果。

同时，聚合物纳米颗粒，尤其是由可生物降解的聚合物，例如聚己内酯，制成的纳米颗粒，正由于其高度的生物相容性而受到极大的关注。然而，这些纳米颗粒的缺点在于它们在本质上是疏水的，因此不适合递送亲水性药物或抗原。

已经报道了聚γ-谷氨酸在体内递送蛋白质或增强体液免疫的应用中的实例(Akagi，T.et al.，J.controlled release，108：226，2005；Uto，T.et al.，，the J，Imunol.，178：2979，2007)。然而，当聚γ-谷氨酸单独用作佐剂时，它不具有足够的产生抗体的能力。因此，需要进一步加强聚γ-谷氨酸诱导抗原特异性免疫的能力。