[发明专利]包含减毒的牛支原体菌株的疫苗和减毒的方法

权利要求书

1.一种减毒、无毒力牛支原体(M.bovis)细菌菌株，其中该细菌传代超过110次。

2.依照权利要求1的减毒、无毒力牛支原体细菌菌株，其中该减毒、无毒力牛支原体菌株选自下组：以登录号PTA-9666保藏于ATCC的减毒牛支原体细菌菌株，其任何减毒后代牛支原体细菌菌株，和与以登录号PTA-9666保藏于ATCC的牛支原体细菌菌株具有相同特征的任何减毒、无毒力牛支原体细菌菌株。

3.依照权利要求1的减毒、无毒力牛支原体细菌菌株，其中该减毒、无毒力牛支原体菌株选自下组：以登录号PTA-9667保藏于ATCC的减毒牛支原体细菌菌株，其任何减毒后代牛支原体细菌菌株，和与以登录号PTA-9667保藏于ATCC的牛支原体细菌菌株具有相同特征的任何减毒、无毒力牛支原体细菌菌株。

4.依照权利要求1至3任一项的减毒、无毒力牛支原体细菌菌株，其中所述减毒、无毒力牛支原体细菌菌株在用作活疫苗时将动物组中的死亡率和安乐死率与未接种疫苗的对照动物组相比降低至少83％。

5.依照权利要求1至4任一项的减毒、无毒力牛支原体细菌菌株，其中所述减毒、无毒力牛支原体细菌菌株在用作活疫苗时在施用单剂所述疫苗之后将动物组中的死亡率和安乐死率与未接种疫苗的对照动物组相比降低至少56％。

6.依照权利要求1至5任一项的减毒、无毒力牛支原体细菌菌株，其中所述减毒、无毒力牛支原体细菌菌株在用作活疫苗时与以登录号PTA-9667保藏于ATCC的牛支原体细菌具有相同特征，如使用本文所述方法通过相同遗传指纹表征的。

7.一种使牛支原体减毒的方法，包括：

a.将牛支原体细菌传代超过110次以生成培养的牛支原体细菌；

b.获得培养的牛支原体细菌；

c.对步骤b)下获得的培养的牛支原体细菌测试它们的致病性和免疫原性；并

d.繁殖非致病性但免疫原性牛支原体细菌以获得减毒牛支原体细菌。

8.依照权利要求7的方法，其中该牛支原体细菌在体外传代。

9.依照权利要求7或8的方法，其中该免疫原性测试包括：

a.用经过传代的牛支原体细菌感染牛；并

b.对受到感染的牛监测牛支原体感染的临床症状的发生。

10.依照权利要求7至9任一项的方法，其中该免疫原性测试包括：

a.用经过传代的牛支原体细菌感染牛；并

b.监测受到感染的牛中针对牛支原体的体液抗体应答的发生。

11.一种免疫原性组合物，其包含依照权利要求1至6任一项的任何减毒、无毒力牛支原体细菌菌株的活细菌。

12.依照权利要求11的免疫原性组合物，特征在于该免疫原性组合物每剂包含至少1.0E7 CFU的减毒、无毒力牛支原体细菌的活细菌。

13.依照权利要求11或12的免疫原性组合物，其中一剂该免疫原性组合物在1或2ml中配制。

14.依照权利要求11至13任一项的免疫原性组合物，其中所述免疫原性组合物配制用于单剂施用。

15.依照权利要求11至14任一项的免疫原性组合物，其中该免疫原性组合物在单剂施用后14天内有效刺激免疫力发生。

16.依照权利要求11至15任一项的免疫原性组合物其中该免疫原性组合物在免疫原性组合物的单剂施用后有效刺激至少42天的免疫力持续时间。

17.依照权利要求11至16任一项的免疫原性组合物，其中所述免疫原性组合物进一步包含一种或多种别的免疫学活性成分，其对于治疗和/或预防牛中由与牛支原体不同的牛病原体引起的微生物学感染是有效的。