[发明专利]通过抑制NRF2的天然反义转录物治疗核因子(红细胞衍生2)-样2(NRF2)相关疾病

说明书

在先申请的引用

本申请要求于2009年3月16日提交的题目为“Antisense Compounds for Nuclear Factors(核因子反义化合物)”的美国临时专利申请号61/160,369和2009年5月26日提交的题目为“Nuclear Factor(Erythroid-Derived 2)-Like 2 Antisense Oligonucleotides(核因子(红细胞衍生2)-样2反义寡核苷酸)”的美国临时专利申请号61/181,062的优先权，二者均通过引用以其整体结合到本文中。

发明领域

本发明的实施方案包括调节NRF2及相关分子的表达和/或功能的寡核苷酸。

发明背景

DNA-RNA和RNA-RNA杂交对包括DNA复制、转录和翻译在内的核酸功能的许多方面均很重要。杂交对于检测特定的核酸或改变其表达的各种技术也很重要。例如，反义核苷酸通过与靶RNA杂交来扰乱基因表达，从而干扰RNA剪接、转录、翻译和复制。反义DNA具有额外的特点是，DNA-RNA杂合体作为存在于大多数细胞类型中的核糖核酸酶H消化活性的底物。可将反义分子递送到细胞中，其如寡脱氧核苷酸(ODN)的情况，或可自内源基因将其表达为RNA分子。FDA最近批准了一种反义药物VITRAVENE^TM(用于治疗巨细胞病毒性视网膜炎)，这反映了反义物具有治疗效用。

概述

本概述被提供用于表示本发明概述，以简要地指出本发明的特性和主旨。应该理解其提交不应被用来解释或限制权利要求的范围或含义。

在一个实施方案中，本发明提供用于抑制天然反义转录物作用的方法，其通过使用靶向天然反义转录物的任何区域的一种或多种反义寡核苷酸导致上调相应有义基因来进行。本文亦预期天然反义转录物的抑制可通过被认为落入本发明范围内的siRNA、核酶和小分子来实现。

一个实施方案提供一种体内或体外调节患者细胞或组织中NRF2多核苷酸的功能和/或表达的方法，所述方法包括将所述细胞或组织与5-30个核苷酸长度的反义寡核苷酸接触，其中所述寡核苷酸与包含SEQ ID NO：3(图3)的1-5808位核苷酸内的5-30个连续核苷酸的多核苷酸的反向互补序列具有至少50％的序列同一性；藉此体内或体外调节患者细胞或组织中的NRF2多核苷酸的功能和/或表达。

在另一优选实施方案中，寡核苷酸靶向NRF2多核苷酸的天然反义序列，例如在SEQ ID NO：3中所示的核苷酸及其任何变体、等位基因、同源物、突变体、衍生物、片段和互补序列。反义寡核苷酸的实例示于SEQ ID NO：4-6(图4)。

另一实施方案提供一种体内或体外调节患者细胞或组织中NRF2多核苷酸的功能和/或表达的方法，所述方法包括将所述细胞或组织与5-30个核苷酸长度的反义寡核苷酸接触，其中所述寡核苷酸与NRF2多核苷酸的反义物的反向互补序列具有至少50％的序列同一性；藉此体内或体外调节患者细胞或组织中的NRF2多核苷酸的功能和/或表达。

另一实施方案提供一种体内或体外调节患者细胞或组织中NRF2多核苷酸的功能和/或表达的方法，所述方法包括将所述细胞或组织与5-30个核苷酸长度的反义寡核苷酸接触，其中所述寡核苷酸与NRF2反义多核苷酸的反义寡核苷酸具有至少50％的序列同一性；藉此体内或体外调节患者细胞或组织中的NRF2多核苷酸的功能和/或表达。

在一个优选实施方案中，一种组合物包含一种或多种与有义和/或反义NRF2多核苷酸结合的反义寡核苷酸。

在另一优选实施方案中，寡核苷酸包含一个或多个修饰或取代核苷酸。

在另一优选实施方案中，寡核苷酸包含一个或多个修饰键。

在又一实施方案中，修饰核苷酸包括含硫代磷酸酯、甲基膦酸酯的修饰碱基，肽核酸，2’-O-甲基、氟-或碳、亚甲基或其它锁定核酸(LNA)分子。优选修饰核苷酸是锁定核酸分子，包括α-L-LNA。

在另一优选实施方案中，将寡核苷酸皮下、肌内、静脉内或腹膜内给予患者。

在另一优选实施方案中，寡核苷酸以药物组合物给予。治疗方案包括将反义化合物给予患者至少一次；然而，该治疗可修改为在一段时间内包括多个剂量。该治疗可与一种或多种其它类型的治疗联合。

在另一优选实施方案中，将寡核苷酸包封在脂质体中，或连接到载体分子(例如胆固醇、TAT肽)上。

下文阐述其它方面。

附图简述

图1：