[发明专利]鸟类性别判定的方法

权利要求书

1.一种用于孵化前鸟类蛋中胚胎的性别鉴定的方法，包括步骤：

a.在蛋中引入匹配胚胎的性别特异性抗原的抗体，该抗体是被标记的，

b.使标记的抗体移动到胚胎上的性别特异性抗原并与之结合，

c.使用位于蛋外的检测装置检测所述标记抗体在胚胎上的结合。

2.权利要求1的方法，其中标记的抗体被注射入蛋内，优选通过使用针头的微量注射或使用高压流体喷射的微流体注射或渗透。

3.权利要求1或2的方法，其中标记的抗体被注射到卵白中。

4.权利要求1或2的方法，其中标记的抗体被注射到气囊中，并通过内壳膜扩散。

5.权利要求1-4任一项的方法，其中标记的抗体在孵育开始前被注射。

6.权利要求1-5任一项的方法，其中标记的抗体被注射，并给其足够的时间扩散和迁移到胚胎上的性别特异性抗原并与之结合。

7.权利要求1-6任一项的方法，其中胚胎上的性别特异性抗原是W染色体特异性的蛋白抗原，或ZZ染色体特异性的蛋白抗原，或其他间接表达的性别特异性蛋白。

8.权利要求1-7任一项的方法，其中检测在孵育开始后2-10天，优选2-7天，更优选2-5天进行。

9.权利要求1-8任一项的方法，其中胚胎上的性别特异性抗原选自W特异性基因/蛋白表达，特别是CHD1W、ATP5A1W、Spin-W、ASW，以及最优选是FET-1(雌性表达的转录物；跨膜结构域)，或ZZ特异性基因/蛋白表达，特别是DMRT1、SF1和Dax1，或间接表达的性别特异性蛋白，尤其是AMH(抗苗勒管激素)。

10.权利要求1-9任一项的方法，其中抗体是多克隆抗体、单克隆抗体或重链抗体或其片段。

11.权利要求1-10任一项的方法，其中标记抗体与胚胎的结合存在与否通过测定胚盘附近的标记抗体浓度并将测得的浓度与预定的标准比较而进行检测，所述的标准优选来自未受精或未孵育的蛋。

12.权利要求1-10任一项的方法，其中标记抗体与胚胎的结合存在与否通过检测标记抗体分布的不均一性进行检测。

13.权利要求12的方法，其中不均一性如下确定：测定标记的抗体在接近胚盘的区域和远离胚盘的区域的局部浓度，通过与预定标准比较所述测定的浓度的差异或比值来确定结合存在与否，该标准优选从未受精或未孵育的蛋中获得。

14.权利要求12或13的方法，其中远离胚盘的区域位于与卵黄的胚盘侧相对的另一侧。

15.权利要求1-11任一项的方法，其中所述抗体用可通过光检测的标记物标记，优选荧光基团。

16.权利要求1-15任一项的方法，其中检测装置包括光源、检测器和任选的滤光片以改善吸收或发射光的信噪比，优选为光谱仪。

17.权利要求15或16的方法，其包括第一和第二检测装置，其中第一检测器测定胚盘附近的标记抗体浓度，其中第二检测器测定远离胚盘区域的标记抗体浓度，优选在卵黄的另一侧。

18.权利要求16或17的方法，其中选择检测装置的波长，使得光源的光和/或抗体上标记基团发射的光被卵黄吸收，以区分胚盘附近的第一检测器的测定和卵黄另一侧的第二检测器的测定。

19.权利要求16-18任一项的方法，其中光源和/或检测器通过蛋壳上的小开口引入蛋中，优选在气囊中，但优选不穿过内壳膜。

20.权利要求16-18任一项的方法，其中光源和/或检测器放置在蛋外，并且其中激发光和/或发射光的波长基本上不被蛋壳吸收或散射。

21.权利要求20的方法，其中激发光和/或发射光的波长选自700-2000nm之间，优选700-1500、更优选700-1000或610-630nm之间。