[发明专利]用于治疗急性骨髓性白血病的方法

说明书

发明领域

本发明属于分子医学领域，并提供了用于治疗急性骨髓性白血病的方法。这些方法是基于microRNA-9和/或microRNA-9*(microRNA-9/9*)参与疾病的发病机理这一观察，因为microRNA-9/9*的过表达在体外阻断髓系分化。更具体来说，发现在急性骨髓性白血病中，microRNA-9/9*在白血病转化中发挥作用。

发明背景

急性骨髓性白血病(AML)是显著非均质的恶性肿瘤疾病，其特征为被阻断在不同发育阶段的造血祖细胞不受控制的克隆增生。变化的临床生物学和预后主要由体细胞遗传学畸变例如t(15；17)、t(8；21)、inv(16)、11q23、3q26畸变和单染色体核型(1-3)以及各种基因突变所决定。突出的实例是核仁磷酸蛋白-1(NPM1)、fms样酪氨酸激酶受体(FLT3内部串联复制(ITD))和CCAAT结合性转录因子CEBPA中的突变(4-7)。这些获得性遗传畸变可能共存，并被认为在白血病的发生中协同合作。

AML的发病机理是影响细胞分化、增殖和凋亡的多步骤过程，其最终导致造血祖细胞的恶性转化。发病机理的概念认为，白血病转化需要至少两个、在大多数情况下可能需要多个事件存在。一类遗传畸变(1类)导致增殖性信号传导的组成性活化，并包括信号传导分子例如RAS、FLT3和c-KIT。第二种类型的病变(2类)，例如作为染色体病变t(8；21)或inv(16)的结果而形成涉及转录因子的融合基因，导致阻断了髓系分化。在小鼠模型中进行的各项研究确定了两种类型的遗传去调控在AML发生中的协同作用。

关于AML中异常表达的基因存在大量信息。通常，AML及其临床亚类的诊断是基于被合称为分类物的基因表达情况分布图。

最近已经证实，AML中的microRNA表达情况分析也揭示出非常独特的microRNA表达情况分布图(8)。

MicroRNA是一类小的非编码RNA，其在转录后水平上调控基因表达(9)。它们通过与mRNA的3’非翻译区(3’UTR)中的序列形成碱基对，从而抑制翻译或诱导它们的靶mRNA转录本的降解，来调控基因表达。到目前为止，在人类中已描述了超过400种microRNA；然而，这些调控性非编码RNA的确切功能仍有许多不明之处。

差异表达的microRNA似乎确定了特定AML基因型的特征。几种已确定的致瘤和肿瘤抑制性microRNA例如microRNA-155、microRNA-21和let-7，似乎与AML的特定遗传亚型相关(8)。

Lu等(10)显示了microRNA基因活性模式可以辨别几种类型的人类癌症。他们在一种新的、基于珠子的流式细胞术microRNA表达情况分析方法中，测量了217个编码microRNA的基因的活性。因此，microRNA特征能够对癌症进行分类。该发现可以允许确定产生癌症的原始组织类型，并根据原始组织类型靶向治疗过程。Lu等观察到在肿瘤中与正常组织相比，microRNA普遍下调。

此外，他们能够使用microRNA表达情况分布图成功分类分化不良的肿瘤，而信使RNA表达情况分布图在应用于相同样品时极不准确。这些发现突出了microRNA表达情况分析在癌症诊断中的潜力。

最近的研究显示出microRNA表达特征与AML的(细胞)遗传学子集之间的关联(8，11，12)。此外，已证实，包含microRNA-233、-128a、-128b和let7b的microRNA表达特征能够准确地将AML与急性成淋巴细胞白血病ALL区分开(13)。

在一项AML研究中，microRNA-191和-199a的表达增加与不良的存活率相关(12)。

鉴定到了对不利预后具有预测性的细胞遗传学正常的AML的microRNA特征(14)。

另一项研究显示，在实体和血液肿瘤两者中，let-7/miR-98簇通常被下调，而microRNA-21、microRNA-155、microRNA-181b、microRNA-221和microRNA-222经常被上调(15)。

Chen及其同事(16)首先从正常小鼠的骨髓中克隆了microRNA，并发现microRNA-223、-142和-181优选表达在造血组织中。发现microRNA-233以低水平表达在CD34+造血祖细胞(HPC)中，并且在朝向粒细胞的髓系分化过程中，该表达增加。