[实用新型]一种快速定量检测糖化血红蛋白免疫层析试纸条

说明书

技术领域

本实用新型属于免疫化学检测领域，具体来说，涉及一种快速定量检测糖化血红蛋白的免疫层析试纸条。

背景技术

全球糖尿病（DM）患病率很高，目前DM的发病率仍呈不断的上升趋势，是严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题，DM的防治一直是医学研究的热点和难点。传统的DM诊断和监测采用空腹血糖（FBG），餐后血糖（PBG）和口服葡萄糖耐量试验（OGTT）等，但是血糖仪的监测数据仅代表抽血时的瞬间糖水平，而糖化血红蛋白（GHb）作为反映长期血糖水平的金标准，也是监测DM的重要指标。

GHb是指由血红蛋白和葡萄糖通过非酶促的缓慢不可逆结合而成的一种Hb组分。GHb的合成率与血液中的葡萄糖浓度呈直接比例。红细胞的平均寿命是120天左右，所以血液中的GHb的水平代表了120天来的平均水平。HBAlc作为GHb的一种亚型，是GHb各组分中最具有代表性的，同时也是目前研究最为广泛的。

1980年，HBAlc已经成为DM常规临床监测项目，一直作为反映长期血糖水平的金标准和DM并发症的风险监测指标，应用于临床和科研工作中。

临床实验室常用的HBAlc分析方法分为两大类：

⑴基于HBAlc和非HBAlc所带电荷不同，包括阳离子交换层析法、电泳法和等电位聚焦法：阳离子交换层析法利用能交换离子的材料为固定相来分离离子型化合物。该方法批内和批间变异系数（CV）均小于3%，检测结果不受所存在的变异性Hb及其衍生物和各种共存干扰物的影响，精密度好，性能稳定，并且检测快速。缺点是需要昂贵的设备和专业的技术人员，不能实现现场检测。

⑵基于GHb基团结构不同，包括亲和层析法和免疫学方法:亲和层析法中应用最多的是硼酸亲和层析法。使用一种水溶性蓝色硼酸衍生物，总Hb包括与硼酸结合的Hb沉淀，并被据记载过滤层，通过双波长发射比色分析系统进行测定，结果直接以HBAlc百分数表示。这种方法简便、快捷、其CV仅3％，线性范围可达20％，与其他已确认的分析方法相比具有良好的相关性。其缺点依然是不能实现现场检测。

最近，国际临床化学联盟（IFCC）建立了一种通过质谱分析特异性检测HBAlc分子浓度的新方法。首先用生理盐水清洗红细胞，然后去除醛亚胺，用水使红细胞溶解，其溶血产物经内蛋白酶作用获得HBAlc和HBAO的N端6肽，经反相液相色谱分离，最后用电喷雾电离质谱法测定。这种方法操作复杂、费时、花费大、不能用于临床常规检测，仅限于HBAlc测定的标准化。

目前糖化血红蛋白的定量检测的有胶体金定量、放射性免疫和化学发光定量试剂，而采用免疫层析技术定量检测糖化血红蛋白的装置，却未见报道。

基于光电效应的胶体金定量免疫层析技术，由于只能检测硝酸纤维素膜表面的胶体金颗粒的光线，不能真实反应检测线上免疫颗粒的总量，硝酸纤维素膜表面也因其本身材质具有不均匀性，因此用胶体金实现定量检测具有一定的局限性。放射性免疫具有对环境和人体的辐射危害，目前已经逐渐淡出历史舞台。而化学发光试剂盒由于设备昂贵、不能现场快速的实现检测。

实用新型内容

本实用新型所要解决的技术问题是提供一种快速定量检测糖化血红蛋白免疫层析试纸条，使用这种试纸条时，只需要微量的全血样本，即可在15分钟内实现定量检测糖化血红蛋白的含量，大大提高了筛查的速度，灵敏度高、特异性好；并且该试纸条结构简单，易于标准化生产。

本实用新型解决上述问题所采用的技术方案是：一种快速定量检测糖化血红蛋白免疫层析试纸条，包括底板、样品垫、示踪粒子结合垫、固相反应膜和吸水垫，所述样品垫、示踪粒子结合垫、固相反应膜和吸水垫以水平方向顺序相接方式依次固定在底板上，并且所述示踪粒子结合垫设有超顺磁颗粒或荧光颗粒标记的糖化血红蛋白单克隆抗体吸附层；所述固相反应膜上设有糖化血红蛋白单克隆抗体构成的第一检测线和羊抗鼠IgG多克隆抗体构成的质控线。

所述固相反应膜上还设有血红蛋白单克隆抗体构成的第二检测线。

进一步的技术方案，本实用新型还包括盒体，所述底板置于盒体内，并且所述盒体盒面上对应于固相反应膜的位置设有观察窗，对应于样品垫的位置设有加样孔。

所述底板材料为不吸水的硬质塑料或硬纸片。

所述样品垫为玻璃纤维膜材质或者聚酯膜材质。

所述超顺磁颗粒为氨基化超顺磁颗粒、羧基化超顺磁纳米颗粒和羟基化顺磁纳米颗粒中的一种。

所述荧光颗粒为异硫氰酸荧光素、藻红蛋白、多甲藻黄素叶绿素蛋白、碘化丙啶和别藻青蛋白中的一种。