[发明专利]一种连续发酵生产L-乳酸的方法有效
申请号: | 201010624057.0 | 申请日: | 2010-12-31 |
公开(公告)号: | CN102174600A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 李荣杰;崔刚;杨丽 | 申请(专利权)人: | 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 |
主分类号: | C12P7/56 | 分类号: | C12P7/56;C12R1/225 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王加岭;张庆敏 |
地址: | 233030*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 连续发酵 生产 乳酸 方法 | ||
1.一种连续发酵生产L-乳酸的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)将农作物废弃物粉碎后,采用稀碱液、稀酸液、纤维素酶依次处理,制得含糖质量百分比为10%~20%的糖化液;
2)将乳酸菌(Lactobacillus)接种到发酵培养基中,接种量5~10%,发酵温度为30~50℃,200rpm进行厌氧搅拌发酵,当乳酸含量不再增加时发酵结束,停止搅拌,放出80%~85%体积的发酵液,补入新发酵培养基继续发酵,按上述步骤连续发酵5~10批次作为第一代;其中,以步骤1)制得的糖化液为碳源,第一代连续发酵培养基的质量百分比配置如下:总糖10%、酵母膏0.2%~0.4%、牛肉膏0.3%~0.5%、磷酸二氢钾0.03%~0.05%、磷酸氢二钾0.03%~0.05%、氯化钠0.02%~0.03%、硫酸镁0.04%~0.06%、碳酸钙3%~5%;
3)以上一代的发酵液按5~10%的接种量接种到新鲜的发酵培养基中,按步骤2)的方法连续发酵5~10批次;连续发酵驯化3~4代;其中,以步骤1)制得的糖化液为碳源,第二代连续发酵培养基的质量百分比配置如下:总糖15%、酵母膏0.2%~0.4%、牛肉膏0.3%~0.5%、磷酸二氢钾0.03%~0.05%、磷酸氢二钾0.03%~0.05%、氯化钠0.02%~0.03%、硫酸镁0.04%~0.06%、碳酸钙3%~5%;以步骤1)制得的糖化液为碳源,第三或四代连续发酵培养基的质量百分比配置如下:总糖20%、酵母膏0.2%~0.4%、牛肉膏0.3%~0.5%、磷酸二氢钾0.03%~0.05%、磷酸氢二钾0.03%~0.05%、氯化钠0.02%~0.03%、硫酸镁0.04%~0.06%、碳酸钙3%~5%。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述农作物废弃物为秸秆或玉米芯。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,其中步骤1)糖化液的制备方法为,按固液比1∶4~6(w/w)向粉碎的农作物废弃物加入2%(w/v)的稀碱液并置于反应器中,封口后在125℃条件下加热处理50分钟,所得浆液于2000rpm离心;所得固相经水洗后加入容器中,按固液比1∶5~8(w/w)加入2%(v/v)的稀酸液,调节温度到50℃处理1小时,再按照20单位/g纤维素加入纤维素酶,搅拌转速100rpm,酶解时间控制在60~70小时,将料液离心过滤,液相为酶解糖液。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述稀碱液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液或氨水中的一种或几种。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述稀酸液为盐酸、硫酸、醋酸中的一种或几种。
6.根据权利要求1~5任一项所述的方法,其特征在于,所述乳酸菌为Lactobacillus 1.2131。
7.根据权利要求1~5任一项所述的方法,其特征在于,所述发酵温度为35~45℃。
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