[发明专利]一种稳定的液体单试剂血糖试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及医学检验领域中的一种分析试剂，具体涉及一种用于测定葡萄糖含量的葡萄糖氧化酶单一液体测定试剂。

背景技术

本发明糖尿病是以持续高血糖为基本生化特征的一种综合病症。目前全球糖尿病患者已超过1.2亿人，我国患者人群规模也已超过5000万，占总人口的4％左右。

由于糖尿病是终身性疾病，对于已确诊糖尿病的患者，为控制和延缓病情的发展、减少并发症的发生，必须定期、不定期测量血糖，作为医院血常规项目之一，如何快速、准确检测血液中葡萄糖含量有着积极意义。

血液中葡萄糖含量酶法测定方法主要有：己糖激酶法、葡萄糖脱氢酶法、氧化酶法、酶电极、血糖仪等。应用酶学方法测定血液葡萄糖是临床化学中的主流方法。最常用的酶学方法有葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法。其特点是具有较高的灵敏度、准确度和精密度，使用温和的反应条件，操作简单方便，适用于自动分析仪，其中，己糖激酶法、葡萄糖脱氢酶法试剂存在价格昂贵(氧化酶法的2-3倍)的问题。

葡萄糖氧化酶法的测定方法有极谱分析法和比色法两类。但二者的初始反应都是在葡萄糖氧化酶的催化下，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，同时消耗溶液中的氧，产生过氧化氢。极谱分析法使用氧电极检测溶液中氧的消耗量。氧消耗量与葡萄糖浓度呈正比。比色分析法使用葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶的偶联反应系统。初始反应中过氧化氢的生成量与葡萄糖浓度呈正比。在辣根过氧化物催化下，过氧化氢和各种色原反应，生成有色化合物，可进行比色测定。该法的缺点如下：

1、易受还原性物质如抗坏血酸干扰。(参考《全国临床检验操作规程》)第三版，P359，卫生部医政司编制，东南大学出版社2006年11月出版；检验医学与临床2008年8月第5卷第15期，P946，维生素C对血糖检测的影响)

2、常见的以苯酚为色原的葡萄糖氧化酶法混合试剂很不稳定，酶酚混合剂在冰箱只能存放1个月(参考《全国临床检验操作规程(第3版)))，P360-361卫生部医政司编制，东南大学出版社2006年11出版)。

3、有医院反映，血糖为医院血常会项目之一，试剂的需求量很大，未使用的试剂要放在4度冰柜里，试剂存放时如有贴冰箱壁的时间长了试剂会被冻，在复融后会出现试剂中部分酶失活，使试剂不能再使用。冬季向我国东北部寒冷地区的医院送货过程中试剂也会被冻，复融后也会出现酶失活现象，试剂不能使用。使得在经济上造成损失，在运输过程中也造成了不便。

发明内容

本发明的目的是解决原有技术存在的缺陷，发明的目的在于提供一种可以简便快捷并可以快速检验血清或血浆中血糖含量的液体单试剂血糖试剂盒。采用该试剂盒中的试剂，能够利用紫外、可见光分析仪或者半自动/全自动生化分析仪测定出血清、血浆中血糖含量，测定过程中不受血清中Vc的干扰。稳定性强，测定速度快。准确度高，便于运输及存放。所应用的检测原理为葡萄糖氧化酶法：

现有技术中的酶法试剂基本不使用阴离子、阳离子以及两性表面活性剂，认为这些对试剂中的部分酶有影响，会影响酶活，导致测值不准确。但是，发明人发现在试剂盒中采用了非离子表面活性剂和两性表面活性剂的组合使得试剂在抗胆红素干扰方面比较突出；试剂盒中还可添加VC氧化酶，在抗VC效果上比较突出。在试剂中加入了两种表面活性剂以及抗VC氧化酶可能会影响试剂稳定性，因此还可加入稳定剂使得试剂稳定。发明人还发现本发明的试剂盒既解决了抗冻，又保证了空白吸光度、定标吸光度稳定性及测值准确性。

因此，本发明一方面提供一种稳定的液体单试剂血糖试剂盒，包括：50mmol/l-300mmol/l，PH＝6-9的缓冲液、葡萄糖氧化酶3ku-40ku、过氧化物酶0.8ku-40ku、4-氨基安替比林0.1-30mmol/l、色原0.1mmol/l-30mmol/l、防腐剂0.01％-5％、防止冻融后出沉淀并抗干扰的稳定剂A和稳定剂B。

本发明中使用的稳定剂A包括非离子表面活性剂和两性表面活性剂的组合物。

优选地，本发明中使用的非离子表面活性剂选自月桂醇、胆酸钠、正辛基葡萄糖苷、聚乙二醇单十二醚、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯十二烷基醚中的一种或几种，其重量百分含量为0.1％-10％。

优选地，本发明中使用的两性表面活性剂选自烷基二甲基胺醋酸甜菜碱、烷基羟磺基甜菜碱、月桂酸酰胺丙基甜菜碱、烷基羧甲基羟乙基咪唑甜菜碱中的一种或几种，其重量百分含量为0.01％-5％。