[发明专利]一种激活鱼类脂代谢调控基因表达的诱导剂及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术应用领域，具体涉及一种激活鱼类脂代谢调控基因表达的诱导剂及其应用。

背景技术

过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator activated receptor, PPAR）是一类能被内源性脂肪酸以及外源性过氧化物酶体增殖物（peroxisome proliferator, PP）作为配体激活的核转录因子，属Ⅱ型核受体超家族成员。PPAR还因能被内源性脂肪酸及其代谢产物激活而称为脂肪酸受体（fatty acid receptor）。在多种动物体内都存在三类PPARs受体，即PPARα，PPARβ亦称PPARδ及PPARγ，这三种亚型均有特异性，能产生不同的生物学作用。PPAR能够调控许多参与细胞内外脂类代谢的目的基因表达，尤其是编码β氧化过程中一些重要酶类的基因，另外PPAR也参与脂肪细胞的分化，可能对细胞的生长、分化甚至凋亡有重要影响。PPARs是脂肪细胞分化及脂类代谢的重要调节因子，在调控能量代谢方面起中枢作用，能够控制脂肪酸吸收、脂肪沉积和脂肪形成，是稳定脂类代谢内环境和胰岛素抵抗的主要调节因子。因此，对PPARs功能和作用机制的研究引起了许多研究者的兴趣。

人工配合饲料在养鱼业中的应用已经非常广泛。池塘养鱼业中, 由于长期应用配合饲料饲养家鱼, 常常会引起鱼类的脂肪肝和脂肥倾向，影响鱼类的生长和鱼肉的鲜味。随着社会的发展，人们对畜禽产品的组成和风味的要求越来越高，科学、合理地调控畜禽机体脂肪沉积成为动物育种和生产领域的重要课题。PPARs起脂肪感受器的作用，局部改变基因表达以调节脂类代谢。同时调控脂肪细胞分化，对脂肪细胞均具有转录激活作用，其中PPARγ具有最强的促进脂肪细胞分化的能力。根据PPARs的这些生物学功能，寻求更高亲和力与特异性的激活剂或拮抗剂，在医学上用于治疗肥胖、高血脂症、Ⅱ型糖尿病等代谢性疾病；在畜牧生产中提高畜禽瘦肉率和降低禽类腹脂沉积以改善肉质等均具有重要意义。

迄今为止，PPAR基因三种亚型已在灵长类、啮齿类、两栖类、鸟类和一些鱼类中被鉴定和克隆，但有关鱼类PPAR的研究远没有哺乳类动物多。目前已知PPAR三种亚型有一些共同的配体，如PP、多不饱和脂肪酸、胰岛素、非甾体类抗炎药。PPARα配体包括长链不饱和脂肪酸、支链、聚合和氧化型脂肪酸、二十烷类化合物、白三烯B4、贝特类降脂药物和Wy-14563等多种。多聚不饱和脂肪酸、前列腺素和视黄酸是PPARβ的天然配基。PPARγ的配体包括某些前列腺素、前列腺素样分子等，花生四烯酸经环氧合酶、脂氧合酶作用后的代谢产物，如15-脱氧前列腺素J2、脂肪酸衍生物为PPARγ的天然配体。目前尚未见有将氯贝丁酯、2-溴软脂酸、15-脱氧-Δ12,14-前列腺素J2用于调节草鱼体内脂类代谢平衡的相关研究报道。

草鱼（Ctenopharyngodon idella）是我国主要养殖对象，可以有效利用廉价的植物蛋白源提供水产品，但是草鱼在养殖过程中体脂含量增加及脂肪肝的发生表现较为突出。在集约化养殖条件下,由于大量摄入人工配合饲料及缺少运动，草鱼体内脂肪沉积，生长缓慢，体型异常，降低了鱼肉品质和风味，同时也增加了养殖成本。经解剖检查，体腔内脂肪大部分沉积在肠道周围、肠系膜上或肝脏表层, 严重者肝脏失去血色, 呈乳黄色或灰黄色。因此在鱼类饲料中添加降脂因子，降低其体组织脂肪的蓄积成为近几年水产动物营养学的研究热点。

发明内容

本发明的目的在于根据现有的鱼类养殖中存在的鱼体内脂肪沉积、生长缓慢、体型异常等缺点，提供一种可维持鱼类营养代谢平衡，减少鱼类脂肪沉积，改善鱼肉品质的诱导剂。

本发明另一目的在于提供上述诱导剂的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案予以实现：

一种激活鱼类脂代谢调控基因表达的诱导剂，包括氯贝丁酯、2-溴软脂酸、15-脱氧-Δ12,14-前列腺素J2中的一种或几种的混合物。

本发明将氯贝丁酯（Clofibrate），2-溴软脂酸（2-bromo palmitate），15-脱氧-Δ12,14-前列腺素J2（15-deoxy-Δ12,14- prostaglandin J2, 15d-J2)作为诱导剂对草鱼进行活体注射，注射微量（mg/kg级），激活草鱼脂类代谢调控基因，特别是过氧化物酶体增殖体激活受体（PPAR）基因表达，以维持养殖鱼营养代谢平衡。

首先本发明人研究了鱼体内PPAR对于脂肪代谢影响：