[发明专利]一种用于生态土壤系统基质DNA的提取方法无效
| 申请号： | 201010589338.7 | 申请日： | 2010-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN102094004A | 公开（公告）日： | 2011-06-15 |
| 发明（设计）人： | 王延华 | 申请（专利权）人： | 南京师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 210046 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 生态 土壤 系统 基质 dna 提取 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于生态土壤系统基质DNA的提取方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）在细胞裂解前对样品进行预处理：称取土样，加入TE缓冲液，涡旋振荡1分钟，放入超声波常温水浴10分钟，上清液中再加TE缓冲液，摇匀，在4℃，10,000×rpm下离心5分钟，移去上清液；
（2）经过预处理后的土样中加入磷酸钠缓冲液和MT缓冲液，置于FastPrep仪器上2分钟，速度5.5，冰上冷却后，在4℃，14,000×g下离心15分钟，上清液中加入PPS试剂，在4℃，14,000×g下离心5分钟，上清液中加入Binding Matrix 悬浮液，待蛋白质沉淀，移去上清液，混合物转移至SPINTM滤管中，在4℃，14,000×g下离心后，加入SEWS-M，在4℃，14,000×g下离心，移去SPINTM滤管，放入试剂盒提供的试管中，室温干燥5分钟，加入DES和重悬的DNA洗脱液体，在4℃，14,000×g下离心后转移洗脱的DNA到试管中进行浓度分析，分离的DNA，贮存于-20℃。
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