[发明专利]一种无患子总皂苷提取纯化的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物果实有效成分的提取，尤其涉及一种无患子总皂苷的提取纯化的方法。

背景技术

无患子(Sapindus mukorossi Gaerth.)也叫肥皂树或洗手果 ,为无患子科无患子属的一种落叶乔木 ,在东南亚各国、我国的台湾省及淮河以南各省均有分布。无患子假种皮中含有丰富的糖苷类物质，主要为三萜皂苷类和倍半萜糖苷类，具有良好的起泡性和去污性能,可作为天然活性物质用于洗发香波及各种洁肤护肤化妆品中；它还具有抗菌和止痒等生理功效,可用于脚癣的治疗；Ojha等研究表明，相对于人工合成的非离子性清洁剂如N-9，无患子总皂苷对乳酸杆菌的毒性低，可用于女性卫生用品。

虽然无患子有多种功效，但因种种原因,无患子总皂苷及其苷元的上述功效均还处在定性研究阶段,系统地阐述无患子总皂苷提取工艺及开发利用还未见文献报道。与此同时,每年却有大量的无患子果实被人弃之路旁,任其自生自灭,造成极大的资源浪费。21世纪被专家预言为生物学世纪,生物科学的发展及其应用越来越受到人们的重视,相信具有特殊生物活性的无患子总皂苷及其苷元的研究开发,也必引起人们的关注。

无患子总皂苷的提取方法主要包括水提法或有机溶剂提取法。水提法的提取率较高，但是往往会将一些单糖、寡糖、氨基酸、蛋白质、黏液质等也提取出来，导致提取物中的总皂苷纯度降低。朱亚红等研究发现，水、甲醇、乙醇等溶剂在室温下对无患子总皂苷提取率均可达50%以上，其中用甲醇(提取率为59.85%)、乙醇(提取率为58.3％)的提取率优于用水（提取率为51.6％)的提取率。饶厚曾等用索氏提取法比较了50%乙醇、95%乙醇、正丁醇等对水预处理后的无患子的提取效果，结果表明用乙醇提取时提取率在72%~74%，而正丁醇的提取率仅为34.77%。此外，他们还发现用微波萃取法以正丁醇溶剂时的提取效果较好，无患子总皂苷回收率可达16.9%。魏凤玉等采用水提-大孔树脂吸附分离法及超滤法对无患子总皂苷进行分离纯化，总皂纯度可分别达85%、67.2%，但工业化生产成本高。综上所述，虽然研究者们对无患子的分离提取研究做了不少工作，但总的来说都还处于初步研究阶段，要实现规模化生产还存在纯度低(如水提法)或是成本高、可操作性差等缺点。

发明内容

本发明的目的在于克服上述无患子总皂苷提取方法中存在的缺陷，提供一种低成本、高纯度、操作简便、绿色环保的无患子总皂苷提取纯化的新方法。

本发明所采用的技术方案为一种无患子总皂苷提取纯化的方法，该方法包括以下步骤：

第一步：将干燥后的无患子果皮粉碎到5-20目，加2-10倍的水，在20-80℃的恒温、常压状态下搅拌，提取1-5次，每次提取1-24 小时，固液分离，合并提取液；

第二步：将上述提取液进行72℃杀菌15s后冷却，去除有害杂菌，接种1%-5%酵母菌或米曲霉，在25-35℃培养2-30天，离心后取上清液；

第三步：将上述上清液喷雾干燥得总皂苷粉末，干燥的环境下密封保存。

本发明用水作为提物剂提取无患子果皮中的总皂苷，虽然初步提取纯度不高，但通过选取能消耗无患子提取液中的蛋白质、糖类等营养成分，但不能消耗无患子总皂苷的微生物，并对其在无患子提取液中接种量、接种龄、温度、时间等条件的优化，使微生物在提取液中大量繁殖，最大限度地消耗提取液中蛋白质、糖等营养成分，又因为无患子总皂苷含量保持不变，所以纯度明显增加；且水提液体积下降，有一定的浓缩作用，从而达到低成本、高产率、高纯度的要求。

本发明与现有技术相比，具有以下明显的优势和有益效果：

1 本发明提供了一种低成本，高纯度，操作简单，绿色环保的无患子皂苷提取纯化的新方法，为实现或完善无患子总皂苷的工业化生产奠定了基础。

2 通过人为接种特定真菌，优化其生长条件，更高效率地提高其生长速度，从而提高无患子总皂苷纯度；并且由于外加微生物的优势生长，可以抑制无患子提取液中杂菌的生长，所以不用添加任何防腐剂或微生物抑制剂，就能防止腐败菌变异腐败。

3 由于人为接种微生物的生长，呼吸作用消耗水提液中大量糖类和水，所以水提液体积减少，达到了一定的浓缩作用，这比工业上运用浓缩装置更环保，更节能，成本更低，经济效益增大。

4 本发明的无患子总皂苷，纯度较高，可以直接用于洗涤用品和化妆品中，涵盖范围广，经济效益高。

具体实施方式

下面的实施例可以使本专业的技术人员更理解本发明，但不以任何形式限制本发明。