[发明专利]一种适合蓝莓快速育苗组织培养的培养基制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及到培养基领域，是一种适合蓝莓快速育苗组织培养的培养基制备方法。

背景技术

蓝莓(Blueberry)，属杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium spp)，越橘属植物约有400多个品种，原产和主产于美国又被称为美国蓝莓，意为蓝色的浆果之意。蓝莓是一种小浆果，果实呈蓝色，色泽美丽、悦目、果肉细腻，种子极小。蓝莓果实平均重0.5～2.5g，最大重5g，可食率为100％，甜酸适口，且具有香爽宜人的香气，为鲜食佳品。蓝莓果实中含有丰富的营养成分，它不仅具有良好的营养保健作用，还具有防止脑神经老化、强心、抗癌软化血管、增强人的机体免疫等功能，誉称为当今世界上最具有发展前途的黄金水果。

有关资料分析全世界年需80万吨，但是每年只能产40万吨，预计二十年内难以实现产销平衡，市场需求大，但蓝莓为什么又发展慢，主要原因是受苗木紧缺瓶颈的制约，由于价格贵，鲜果都用于市场，扦插成活率低，便又由于培养基配制技术的制约导致苗木繁殖技术长期处于难以推广状态。

常用的培养基特点：

1、MS培养基。它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，PH值高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好，有些培养基是由它演变而来的。

2、B5培养基。是1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植物。

3、White培养基。是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作White改良培养基，提高了MgSO4的浓度和增加了鹏素。其特点是无机盐数量较低，适于生根培养。

4、N6培养基。是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物培养而设计的。其特点是成分较简单，KNO3和(NH4)2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。

5、KM-80培养基。它是1974年为原生质体培养而设计的。其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合的培养。

培养基有许多种类，根据不同的植物和培养部位及不同的培养目的需选用不同的培养基。但是上述各类培养基不适应蓝莓的组织培养。

发明内容

本发明的目的是要提供一种蓝莓组织培养培养基的制备方法。

本发明的技术方案是：

(1)基本培养基的配方和称量：

(2)培养基的配制方法和步骤：

a、先在空烧瓶中加入所要配制总量的50％左右的水；

b、称量；

按照配方正确称取各种原料放于烧杯中。若是合成培养基，各成份要逐一溶解；

称不溶性固形物时，应单独称，若量少的可以与无机盐一起称，但一定要混匀再分装；

c、溶化：

玻棒搅拌，加热溶解，最后定容；

定容：可先加少量水溶解，倒入量筒，再补水到刻度；

d、调pH值：用1N NaOH或1N HCl调pH，用pH试纸对照；

e、加琼脂粉：分装过程中要不断搅拌，以使每管的琼脂粉都能均匀；

f、分装：试管总长的1/4，三角瓶的1/2(装量指固体培养基)；

g、包扎封口：试管和三角烧瓶分别塞上棉塞并包上牛皮纸，包扎成捆，注明何种培养基、时间；

h、灭菌备用；

培养基灭菌后必须在35-37℃下恒温培养24h，确定无菌生长，方可使用。

由于采用了上述技术方案，所制出的培养基适应蓝莓的组织培养。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。

(1)基本培养基的配方和称量：

(2)培养基的配制方法和步骤：

a、先在空烧瓶中加入所要配制总量的50％左右的水；

b、称量；

按照配方正确称取各种原料放于烧杯中。若是合成培养基，各成份要逐一溶解；

称不溶性固形物时，应单独称，若量少的可以与无机盐一起称，但一定要混匀再分装；

c、溶化：