[发明专利]一种冬虫夏草的培育方法

说明书

技术领域  本发明属于药食用菌培育技术领域，涉及一种冬虫夏草的培育方法。

背景技术  冬虫夏草虽然兼有虫和草的外形，却非虫非草，属于菌藻类生物。冬虫夏草与北冬虫夏草属于真菌门虫草属，但为不同的种。它们的生长环境和药用功效截然不同。冬虫夏草是麦角菌科，真菌冬虫夏草是寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，是一种传统的名贵滋补中药材，有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效。冬虫夏草具有保肝益肺、补精填髓、止血、化痰、抗肿瘤，还能滋肺、补肾抵抗各类细菌、降血压。其主要成分之一的虫草素，是一种具有抗生作用和抑制细胞分裂作用的物质，是医学上和国外医学用同位素检测技术对冬虫夏草研究证实，虫草中的是草素和是草酸还有研究证实是草中的虫草酸还具有很高的补肾、壮阳、益精、定喘作用，而且能明显地对抗细胞衰老。药理学现代研究结果中，青海冬虫夏草含有虫草酸约7％，碳水化合物28.9％，脂肪约8.4％，蛋白质约25％，脂肪中82.2％为不饱和脂肪酸，此外，尚含有维生素B12、麦角脂醇、六碳糖醇、生物碱等。由于野生冬虫夏草分布地区狭窄、自然寄生率低、对生活环境条件要求苛刻，所以本身资源比较有限。近年来又由于冬虫夏草主产地生态环境遭到人为严重破坏，大量盲目不合理采挖致使资源日趋减少，产量逐年下降。而冬虫夏草由于可以药食两用，且人们不断发现其新的药理作用，所以多个国家对它的需要倍增，价格逐年上涨，国际市场日益紧缺。为了满足全球市场的需求，目前许多地区如四川、湖北、河南、陕西、云南及湖南等省都相继开展了对冬虫夏草的研究工作。人们对冬虫夏草的研究涉及无性型确证、生态环境考察、化学成分和药理作用分析、人工栽培等方面。

近年来台湾已经开始发展培育冬虫夏草技术研究，但是，目前尚未有相关报道。冬虫夏草作为保健食品的原料之一，因为冬虫夏草的药性平和，不容易产生副作用，所以可以在潜移默化之中改变体质。但是冬虫夏草并不容易采集到，所以价格自然居高不下。开展人工栽培的方法，利用菌丝体来培养可降低大量生产成本，为人类造福！

发明内容  本发明的目的是提供一种冬虫夏草的培育方法，以克服现有技术的不足。

为了实现上述目的，本发明冬虫夏草的培育方法，其要点在于包括以下步骤：

第一步、冬虫夏草一级母种斜面培养：

1、培养基配方：

土豆200克、麦皮50克、磷酸二氢钾2克、葡萄糖20克、蛋白胨10克、链霉素0.5克、琼脂20克、维生素B 4片、水1000毫升；

2、配制方法：

将洗净去皮的土豆切成薄片加水1000毫升煮沸30分钟，至土豆软而不烂时，用4层纱布虑去土豆残渣，取汁液于锅中加入琼脂20克、蛋白胨10克、磷酸二氢钾2克、维生素B4片、链霉素0.5克、葡萄糖20克、麦皮50克并搅拌均匀，继续加热至琼脂完全溶化，趁热迅速分装试管，每个试管装培养基的量与试管的体积比是1∶5，装完后塞上棉塞，然后把试管每10支扎成一捆，用牛皮纸包好放入高压锅灭菌，加热到压力达到0.5Kg/m²时，开排气阀，排出冷空气，使指针回到0点，然后关上排气阀继续加热至121℃时保压40分钟出锅，并趁热把试管摆成斜面，冷却后得固体试管斜面备用；

3、菌种分离培养：

将新鲜健壮的子座在8厘米长的青海野生冬虫夏草清洗后用0.1％升汞溶液或70％的药用酒精对其进行消毒处理，再用无菌水清除其表面的升汞或酒精，冬虫夏草表面消毒处理后，用无菌刀片切去冬虫夏草子座的外层，用接种刀切取其内部组织1立方毫米的小块迅速移接到试管斜面上，并迅速塞上棉塞，然后放入20-28℃的恒温箱中培养15-20天即得冬虫夏草一级母种斜面；

第二步、冬虫夏草二级母种斜面的扩大培养：

将分离的一级母种斜面试管再进行扩大培养，得二级母种斜面试管，二级母种斜面试管的培养基与一级母种斜面试管的培养基相同，移接时严格无菌操作，一支一级母种斜面试管移接20-30支二级母种斜面试管，接种完毕后放入20-28℃的恒温箱中培养10-15天即得冬虫夏草二级母种斜面；

第三步、冬虫夏草液体菌种的培养：

1、培养基配方：

玉米250克、蛋白胨25克、酵母粉2.5克、磷酸二氢钾2.5克、维生素B15片、链霉素2.5克、硫酸镁1克、葡萄糖40克、水2500毫升；

2、配制方法：