[发明专利]一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从银杏叶浸膏中提取纯化聚戊烯醇的方法。

背景技术

聚戊烯醇polyprenol亦称聚异戊烯醇(polyi soprenol)，是异戊二烯单体(异戊烯基)链接成直链状的多聚化合物的总称，在自然界广泛存在。弱极性，易溶于有机溶剂。聚戊烯醇是长链脂肪醇，结构中含有多个非共轭双键，具有非常强烈的吸收自由基的性能。存在于哺乳动物体内的聚戊烯醇类化合物被称为多萜醇，它是生物膜中糖蛋白合成时重要的糖载体，但其含量极低，而银杏叶中聚戊烯醇含量可占干叶重的1～2％，被认为是合成动物多萜醇最合适的中间体。银杏叶中聚戊烯醇类化合物对人体无毒，可作为免疫活性物质，用于治疗因免疫缺陷造成的疾病，并具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用，具有广阔的医药保健应用前景。

聚戊烯醇浸膏通常是用石油醚、正己烷、丙酮、乙醇或超临界二氧化碳等中弱极性溶剂提取银杏叶得到，聚戊烯醇在浸膏中的含量大约在5-20％范围。聚戊烯醇与多种复杂的化学成分存在于银杏叶及其浸膏中，分离提存难度大，步骤多，而且精制效果有限。由于聚戊烯醇是长链聚异戊烯基醇，极性弱，与浸膏中的蜡质物质物理化学性质极为相似，这就给聚戊烯醇的分离提存带来极大的挑战。

发明专利CN01113696.0利用溶剂沉析、萃取和硅胶柱层析等方法对聚戊烯醇进行精制，可得到纯度为95％的聚戊烯醇产品；发明专利CN200410041670.4利用二级分子蒸馏的方法，可以得到75-95％的聚戊烯醇产品；发明专利CN200410074088.8利用超临界二氧化碳分级分离的方法，得到含量为80％聚戊烯醇产品；溶剂沉析和硅胶柱层析法可以除去产品中的大部分极性物质，而对于和聚戊烯醇物化性质(包括极性)接近的蜡质物质的作用十分有限；分子蒸馏具有清洁、绿色等优点，但是其理论基础是按物质的分子自由程的差别进行分离，由于蜡质物质和聚戊烯醇的分子量都具有一个分布较广的范围，使得其分子自由程的交集很大，所以，仅凭分子蒸馏很难将产品中的蜡质物质分离出去，另外，分子蒸馏必需在高真空和较高温度下进行，会增加破坏产品中的聚戊烯醇的结构可能性；超临界二氧化碳分级分离的是根据不同的温度和压力下，超临界二氧化碳对不同物质的溶解度变化不同而进行分离提纯的，这往往要求被分离的物质在极性或分子量等参数具有一定的差别，但是银杏叶浸膏中的蜡质物质和聚戊烯醇都是极性极弱而且分子量具有较广的分布范围的物质，所以，超临界二氧化碳分级分离虽然可以得到80％含量的聚戊烯醇，但是以牺牲工艺的收率为代价。可以看出，现有的工艺过程中，没有针对产品中的蜡质物质的分离的步骤，所以，其产品中还含有一定量的蜡质物质，要想得到纯度较高的聚戊烯醇产品，必需经过复杂的工艺过程，而且工艺收率往往很低。使得聚戊烯醇的产业化生产受到限制。

发明内容

本发明的目的是提供一种工艺简单，收率在80％以上，纯度在98％以上的聚戊烯醇的制备方法。

本发明是以弱极性溶剂提取的银杏叶浸膏为原料，通过皂化、尿素柱层析、结晶等工艺，得到纯度在98％以上的聚戊烯醇产品，并大大提高其聚戊烯醇的收率。

尿素柱层析法主要是一种用来分离提纯脂肪酸的方法。我们在实验中发现，尿素固定相对蜡质物质具有较强的吸附作用，而对于双键个数较多的聚戊烯醇基本没有吸附作用，这样可以利用蜡质物质和聚戊烯醇的吸附差别将它们分离开来，由于尿素是一种极性较大的物质，它同样对于浸膏中的极性物质具有强的吸附作用，所以，可以同时除去浸膏中极性较强的杂质和极性弱的蜡质物质，得到含量高的聚戊烯醇产品，再经过结晶，含量可以达到98％以上，而且尿素柱层析过程的收率高(大于90％)，工艺总体收率(尿素柱层析和结晶)大于80％。本发明具体操作步骤如下：

(1)浸膏皂化：聚戊烯醇浸膏在醇碱溶液中，充分搅拌，在30-80℃下皂化0.5-4h，反应液用酸中和，浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；

(2)尿素固定相的制备：将尿素溶于负载溶剂中，加入载体，使尿素负载在载体上，除去溶剂，制得固定相；

(3)尿素柱层析：将制得的固定相装柱，然后将皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用流动相匀速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干；

(4)结晶：尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的甲醇、乙醇或乙腈中，饱和溶液，冷冻结晶，过滤，干燥得到聚戊烯醇。