[发明专利]目标物的检测方法及目标物检测用层析试剂盒

说明书

技术领域：

本发明涉及一种目标物的检测方法及目标物检测用试剂盒。

背景技术：

现有一种层析法以采自生物的血液、血清、咽喉拭液、鼻腔拭液、鼻涕、尿液等样本为试样检测试样中所含目标物。在此方法中，首先，将可与试样中目标物结合的捕捉物固定到层析实验用具的检测区。用此层析实验用具将结合到目标物的标记物和试样混合而成的混合液展开。以此，标记物标记的目标物被捕捉到检测区。此时，在检测区形成标记物-目标物-捕捉物夹层形状的复合物。在使用有色乳胶粒子或金属胶粒子等标记成分的标记物时，当标记物在检测区被捕捉时，检测区会显色。在层析法中通过观察此检测区的显色即可检测出试样中的目标物。

然而，使用上述有色乳胶粒子等的层析法，检测灵敏度低，如果试样所含目标物极少的话，很难检出目标物。

于是，近年来，有人为高灵敏度地检测目标物，提出了一种在层析法中用荧光物或化学发光物取代有色乳胶粒子作标记成分的方法。

比如日本公开专利JP2002-267671中记述了一种用荧光物作标记成分的免疫层析法。日本公开专利H8-5637中记述了一种用化学发光物吖啶酯作为标记成分的抗体检测法。

然而，上述方法还是达不到市场所要求的检测灵敏度。

发明内容：

本发明的发明者发现，在利用酶化学发光的层析法中展开目标物和酶标记物的混合液后在检测区添加含阴离子表面活性剂的试剂可以提高发光底物的发光强度，从而完成了本项发明。

本发明提供：

(1)一种用层析试验用具检测试样中所含目标物的方法，所述层析试验用具具有检测区，所述检测区固定有能与所述目标物结合的捕捉物，所述方法包括：混合试样和与目标物结合的酶标记物；将所得混合液添加到所述层析试验用具，用所述检测区的捕捉物捕捉与所述酶标记物结合的目标物；在捕捉到所述目标物的所述层析试验用具的检测区添加含阴离子表面活性剂的试剂；使发光底物与通过所述目标物结合到所述检测区的捕捉物的酶标记物的酶发生反应；及检测所述发光底物和所述酶反应所引起的所述检测区的发光，以此检出所述试样中所含目标物。

(2)(1)所述方法，其中：所述阴离子表面活性剂选自十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、正癸基硫酸钠、月桂醇磺基乙酸酯钠、1-十二烷基磺酸钠、P-辛基苯磺酸、1-辛烷磺酸、1-癸烷磺酸钠、辛烷-1-基硫酸钠(Sodium octan-1-yl Sulfate)、月桂基聚氧乙烯(2)醚硫酸钠(POE(2)Sodium lauryl ether sulfate)。

(3)(1)所述方法，其中：用所述层析实验用具展开所述含阴离子表面活性剂的试剂，以此将所述含阴离子表面活性剂的试剂添加到所述层析实验用具的检测区。

(4)(1)所述方法，其中：所述含阴离子表面活性剂的试剂还包括缓冲剂。

(5)(1)所述方法，其中：所述试剂中所含阴离子表面活性剂的浓度为0.0001～0.1重量％。

(6)(1)-(5)中任意一项所述方法，其中：所述发光底物为二氧杂环丁烷类。

(7)(1)-(5)中任意一项所述方法，其中：所述酶标记物的酶是碱性磷酸酶。

(8)(1)-(5)中任意一项所述方法，其中：所述捕捉物为抗体，所述酶标记物是酶标记抗体。

(9)(1)-(5)中任意一项所述方法，其中：通过测定所述检测区发出光的发光强度，定量所述试样中所含目标物，以此检测所述目标物。

(10)(1)-(5)中任意一项所述方法，其中：所述层析试验用具是侧流层析试验用具或穿流层析试验用具。

(11)一种用于检测目标物的层析试剂盒，包括：与目标物结合的酶标记物；具有检测区的层析试验用具，所述检测区固定有能与目标物结合的捕捉物；含阴离子表面活性剂的试剂；通过与所述酶标记物作用而产生发光反应的所述酶标记物的发光底物。

(12)(11)所述试剂盒，其中：所述阴离子表面活性剂选自十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、正癸基硫酸钠、月桂醇磺基乙酸酯钠、1-十二烷基磺酸钠、P-辛基苯磺酸、1-辛烷磺酸、1-癸烷磺酸钠、辛烷-1-基硫酸钠及月桂基聚氧乙烯(2)醚硫酸钠。

(13)(11)所述试剂盒，其中：所述含阴离子表面活性剂的试剂还包括缓冲剂。

(14)(11)所述试剂盒，其中：所述试剂中所含阴离子表面活性剂的浓度为0.0001～0.1重量％。

(15)(11)-(14)中任意一项所述试剂盒，其中：所述发光底物为二氧杂环丁烷类。

(16)(11)-(14)中任意一项所述试剂盒，其中：所述酶标记物的酶是碱性磷酸酶。