[发明专利]风湿定中药制剂检测方法

说明书

技术领域

本发明属于制药领域，涉及一种风湿定中药制剂检测方法，特别涉及风湿定片的检测方法。

背景技术

风湿定片收载于部颁药品标准(WS3-B-2297-97)，由八角枫、白芷、甘草、徐长卿等四味中药材组成，主要用于活血通络，除痹止痛、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、颈肋神经痛、坐骨神经痛。白芷为本方中的主药之一，所含化学成分以挥发油、香豆素类为主，具有散风除湿，通窍止痛，消肿排脓之功效。现代药理实验表明白芷中所含欧前胡素为其重要活性成分之一，多采用HPLC法测定其含量来控制白芷药材及其成药质量。本品在原部颁标准中无含量测定方法，因此本控制方法建立高效液相色谱法测定欧前胡素的含量，可以更有效地控制该成药的质量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种风湿定中药制剂的检测方法。

本发明所述检测方法，提高了风湿定中药制剂质量的专属性和质量稳定性，确保了人们用药的安全性和有效性。

本发明所述的检测方法，包括对药物成分的鉴别方法和欧前胡素的含量测定方法。

其中，所述药物成分的鉴别，包括以下3种方法：

a.取本品约5g，研细，加乙醚15ml，密塞，轻摇，在室温浸渍1小时，滤过，滤液自然挥干，残渣加丙酮0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性的5％三氯化铁乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。

b.取上述乙醚浸提后的药渣，挥去乙醚后加甲醇50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液置水浴上挥去甲醇，加1％盐酸水溶液25ml，并转移至分液漏斗中，用氯仿振摇提取2次，每次15ml，弃去氯仿液，水层用氨试液调pH值至10，用氯仿振摇提取3次，每次15ml，合并氯仿液，用无水硫酸钠脱水，蒸去氯仿，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取八角枫对照药材10g，加适量水煮沸1小时，滤过，滤液浓缩至10ml，用盐酸调pH值至2，自“转移至分液漏斗中，用氯仿振摇提取2次，……”起，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液(90∶10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

c.取本品约5g，研细，加水50ml，置水浴中加热回流30分钟，滤过，取滤液用正丁醇提取2次。每次30ml，合并正丁醇液，加水40ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材同法制成对照药材溶液，另取甘草酸单铵盐对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取以上三种溶液各2ul，分别点于1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶冰醋酸∶甲酸∶水(15∶1∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

所述含量测定，包括以下步骤：

照高效液相色谱法(2005年版附录VID)测定

色谱条件与系统适应性条件以十八烷基键合硅胶为填充剂，甲醇-水(59∶41)；为流动相；检测波长为248nm；理论板数按欧前胡素峰计算应不低于3000

对照品溶液的制备：精密称取欧前胡素对照品适量，加甲醇制成每1ml含10ug的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取本品适量，研细(过80目筛)，取2g，精密称定，精密加入30％-100％甲醇25-50ml，称定重量，超声处理30-70分钟，放冷，过滤，取滤液5ml，蒸干，残渣用甲醇溶解转移至10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每片含白芷以欧前胡素(C16H14O4)计不得少于0.02mg(每片以0.22g计)。

本发明的风湿定中药制剂的检测方法，既增加了定性鉴别方法又增加了有效成份的含量测定方法，提高了风湿定中药制剂质量的专属性和质量稳定性，确保了人们用药的安全性和有效性。本发明的检测方法，检测速度快，准确性高。