[发明专利]表达CIVPS或内含肽修饰蛋白的转基因植物及其制备方法

权利要求书

1.一种在转基因植物中表达修饰蛋白的重组DNA表达构建体，该表达构建体包括编码修饰蛋白的序列，该修饰蛋白具有靶蛋白和融合在该靶蛋白内的内含肽，其中所述的内含肽序列可诱导引起该修饰蛋白的顺式剪接。

2.根据权利要求1所述的方法，该表达构建体进一步包括一或多个核苷酸序列，该核苷酸编码至少一个可选择的标记、报道基因和启动子。

3.根据权利要求2所述的方法，其中：

至少一个可选择标记具有对溴苯腈、2，2-二氯丙酸、G418、草甘膦、吡氟氯禾灵、潮霉素、咪唑啉、卡那霉素、甲氨蝶呤、新霉素、草胺膦、稀禾定、单端孢霉烯、磺脲、s-三嗪、甘露醇和/或三氮嘧啶中一种或多种化学物质的抗性；以及

启动子先于编码修饰蛋白的序列。

4.根据权利要求3所述的方法，其中转基因植物对一种或多种化学物质的常规剧毒性有耐受性或抗性。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述的内含肽选自酵母属真菌、Psp pol内含肽、源于结核杆菌的内含肽和源于Thermococcus litoralis的内含肽。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述的内含肽选自源于适温生物的内含肽。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述的内含肽选自Tersnf2、Ter RIR1-4、Rma dnaB、Tfus recA-1、Tfus recA-2、AaeRIR2、Tth RIR1-1、Tth RIR1-2、Tth DnaE-1、Mex Helic、ChyRIR1、Gob DnaE、BspM1918RIR1、Tvo VMA、Mka CDC48、MkartcB、Mka VatB、Mka RFC、Tfu pol-2、Tag pol-1、Psp pol-1、Pfu topA、Pfu IF2、Pfu CDC21、Pfu lon、Pho pol、PhortcB(PH1602)、Pho CDC21-1、Pho r-gyr、Pho lon、Pho VMA、Pab polC、Pab rtcB(PAB0383)、Pab IF2Pab RIR1-1、PabRIR1-2、Pab RIR1-3、Pab CDC21-1、Pab CDC21-2、Pab RFC-1、Pab lon、Pab VMA、Pab klbA、Pab moaA、Mja pol-1、Mja pol-2、Mja hyp1(MJ0043)、Mja rtcB(MJ0682)、Mja helicase(MJ1124)、Mja GF6P、Mja RNR-1、Mja RFC-1、Mja RFC-2、MjaRpolA’、Mja RpolA″、Mja TFIIB、Mja r-gyr和AApe hyp3(APE0745)。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述的内含肽是热诱导的。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述的靶蛋白选自木质纤维素降解蛋白、源自微生物的木质纤维素降解蛋白、E.C.3.2.1.4等级的纤维素酶、E.C.3.2.1.91等级的外切纤维二糖水解酶、E.C.3.2.1.21等级的葡糖苷酶、内切纤维素酶、外切纤维素酶、木聚糖酶、半纤维素酶、木质酶、木质素过氧化物酶和纤维素酶。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述的靶蛋白为改变至少一种物质水平的蛋白，该物质选自葡萄糖、果糖、甘油、甘氨酸三甲内盐、果胶、蔗糖、乳糖、麦芽糖、半乳糖、一种或多种氨甲酸、一种或多种脂、一种或多种维生素和/或淀粉。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述的靶蛋白为改变至少一种物质活性的蛋白，该物质选自蛋白质、RNA和脂质。

12.根据权利要求1-8中任一权利要求所述的方法，其中所述的靶蛋白选自苏云金芽孢杆菌内毒素、Phytolacca insularis蛋白、病毒Y蛋白、双粒病毒组蛋白、黄瓜花叶病毒2b蛋白和黄瓜花叶病毒蛋白。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述的靶蛋白能降解一种物质，该物质选自淀粉、糊精、胶质、脂、蛋白质、甲壳素、木质素、纤维素和半纤维素。