[发明专利]一种检测液体奶维生素B2的简便方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测液体奶维生素B₂的简便方法，尤其是关于检测液体奶中维生素B₂的检测步骤的改进，属于化学成份检测的技术领域。

背景技术

维生素B₂是各种黄酶辅基的组成成分，它具有可逆的氧化还原特性，可参与机体氧化还原过程。如果人体缺乏维生素B₂会容易患上口角炎、唇干裂、舌炎、阴囊炎、结膜炎、脂溢性皮炎等疾病，并且维生素B₂的缺乏症能导致食欲减退、腹泻等。人们摄取维生素B₂的主要食物来源为乳制品、瘦肉、肝、蛋黄、糙米及绿叶蔬菜，其中乳制品是维生素B₂最好的来源。

食品安全国家标准GB5413.12-2010《婴幼儿食品和乳品中维生素B₂的测定》为专门针对婴幼儿食品和乳品中维生素B₂的检测方法，该国标检测方法采用的是高效液相色谱法，在其进行试样处理的过程中需要除去样品中的蛋白质，因此需要将盐酸消化后的液体奶样品的pH值调至4.0左右后，再加入淀粉酶和脂肪酶，摇匀后还需置于37℃培养箱中过夜，以通过酶解的办法来除去样品中的蛋白质，这样将导致整个检测的时间较长，不利于在急需得出检测结果的场合下使用。

发明内容

本发明提供了一种检测液体奶维生素B₂的简便方法，其可以避免酶解过程，提高检测速度，节省检测成本，保证检测结果。

本发明的检测液体奶维生素B₂的简便方法，包括：

(a) 制备维生素B₂标准溶液，利用高效液相色谱仪对其检测，从而生成维生素B₂含量与峰面积之间对应的标准曲线；

(b) 称取一定重量的液体奶，对其进行预处理从而形成液体奶样品，利用高效液相色谱仪在与步骤(a)相同的条件下对其进行检测，得到液体奶样品的检测峰面积；和

(c) 将步骤(b)中获得的液体奶样品的检测峰面积与步骤(a)中得到的标准曲线进行比对，通过计算确定液体奶样品中的维生素B₂含量，

其特征在于，

步骤(b)中的预处理进一步包括：

(ba) 将液体奶样品用盐酸消解，得到消化液；

(bb) 将步骤(ba)中的消化液冷却后，用乙酸钠溶液调节pH值到4.5，静置20min；

(bc) 将步骤(bb)处理过的消化液定容，摇匀，过滤。

在检测液体奶中维生素B₂方法的一种示意性实施方式中，步骤(ba)进一步包括：取混合均匀的液体奶25克于150mL三角瓶中，加入0.1moL/L的盐酸50mL，充分摇匀，然后置于高压灭菌锅中，在121℃的温度下保持30min。通过上述步骤， 可使液体奶样品的消化更充分，以提高检测的准确性。

在检测液体奶中维生素B₂方法的一种示意性实施方式中，乙酸钠溶液的摩尔浓度可以是2moL/L，以便更有利于液体奶样品的预处理。

在检测液体奶中维生素B₂方法的一种示意性实施方式中，可取滤液经过0.22um水相滤膜进行过滤，用以增强过滤效果。

在检测液体奶中维生素B₂方法的一种示意性实施方式中，可制备浓度分别为0.00μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL的维生素B₂标准溶液，以提高检测的准确性。

在液体奶样品预处理过程中，本发明通过乙酸钠溶液调节pH值到4.5，利用蛋白质的等电点，通过沉淀除去液体奶中的蛋白质，而无需加入淀粉酶和脂肪酶，更无需将液体奶样品置于37℃培养箱中过夜，当天即可进行检测，节省检测时间约12小时，并且可以在保证检测结果准确性的同时，减少检测成本。

具体实施方式 

下面将结合具体实施方案对本发明的方法做更详细的说明。本领域技术人员应当理解，下述实施例均用于对本发明所要求保护的范围进行实例性的描述，以此概括本发明的各参数的相对范围，因而不能将之理解为对本发明的一种具体限制。

1)仪器和设备

万分之一天平、150mL三角瓶、100mL容量瓶、高压灭菌锅、0.22um水相滤膜、配带荧光检测器的高效液相色谱仪。

2)色谱条件