[发明专利]一株虫生广布拟盘多毛孢菌株GXSTYJ03及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术防治领域，具体涉及一株虫生广布拟盘多毛孢真菌(Pestalotia disseminata(Thuem.)Stey.)的新菌株GXSTYJ03和通过培养它制备成菌液的方法以及菌液在松突圆蚧防治上的应用。

背景技术

已知的拟盘多毛孢真菌(Pestalotia)均分离自植物体，或为植物病原真菌，或为植物内生真菌。长期以来人们一直把拟盘多毛孢真菌当作植物病原菌进行研究，直到20世纪90年代才开始有内生拟盘多毛孢的报道。而本发明分离自松突圆蚧僵虫体的广布拟盘多毛孢真菌菌株(GXSTYJ03)应属虫生真菌，关于虫生拟盘多毛孢真菌的研究和应用至今仍无报道。

松突圆蚧Hemiberlesia pitysophila Takagi，又名松栉盾蚧，隶属同翅目Homoptera蚧总科Cocoidea盾蚧科Diaspididae灰圆盾蚧亚科Diaspidinae突圆蚧属Hemiberlesia。主要危害松属植物，在我国松突圆蚧的发生区，目前主要危害马尾松、湿地松和加勒比松。至今，不仅最早发生危害的广东全境的松树受其危害，损失惨重，近年来又在福建、广西、江西等地迅速扩散蔓延，从幼树至二三十年生的大树均可受害，造成大面积的松林枯死，防控形势非常严峻，是我国对内对外的有害生物检疫的害虫。

目前，控制松突圆蚧危害的主要措施有综合营林措施和天敌小蜂寄生。各种天敌小蜂在松突圆蚧上的寄生率不同，最高可达30％。大面积放养小蜂对控制松突圆蚧的虫口密度有一定的作用，但由于种源有限，繁育成本高，其应用受到严重制约。

探索微生物防治技术也取得一些可喜的进展。用寄生在甘蔗粉蚧上的寄生曲霉菌对松突圆蚧进行致病力试验，其寄生率为13.9％～64.9％。采用板栗红蚧上分离的芽枝状枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)菌粉对3467头松突圆蚧毒力测定，平均死亡率达38.9％；林间试验效果达20.0％以上，最高达57.7％。然而，该两种微生物防治技术的研究都未能进入开发应用阶段。

上述防控措施，均存在防控效果不理想或防控寄生率低的不足。因此，必须针对松突圆蚧的生物学特点，研制出有效防治和控制松突圆蚧的应用技术。

发明内容

本发明的目的在于提供一株虫生广布拟盘多毛孢菌株GXSTYJ03以及该菌株的液体培养物制备方法和用途。该菌株的液体培养物制剂能够有效防治和控制松突圆蚧。

本发明人经过广泛的调查研究，从松突圆蚧典型僵虫体上分离、筛选，获得一株广布拟盘多毛孢真菌(Pestalotia disseminata(Thuem.)Stey.)菌株GXSTYJ03。基于提供防治松突圆蚧微生物菌株的目的，作了进一步的研究，该菌株能够有效致死松突圆蚧，并可通过制备该菌株的液体培养物来实现。

一株松突圆蚧虫生真菌菌株GXSTYJ03，该菌株是从松突圆蚧僵虫体中分离、筛选出来的广布拟盘多毛孢菌株系(学名：Pestalotia disseminata(Thuem.)Stey.)，所述菌株含有GXSTYJ03 ITS rDNA序列SEQ ID NO.03，于2010年7月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号为：CGMCC3990。

一株虫生广布拟盘多毛孢菌株GXSTYJ03在制备防治松突圆蚧的制剂中的应用。

所述一株虫生广布拟盘多毛孢菌株GXSTYJ03在制备防治松突圆蚧的制剂中的应用，是将所述一株虫生广布拟盘多毛孢菌株GXSTYJ03的液体培养物直接喷施于染虫的树冠上或稀释3-5倍后施用或均浆后稀释3-5倍施用。

一株虫生广布拟盘多毛孢菌株GXSTYJ03的液体培养物在防治湿地松粉蚧的制剂中的应用。

所述一株虫生广布拟盘多毛孢菌株GXSTYJ03的液体培养物的培养方法，采用下列液体培养基中的一种按所述培养条件制备：

A培养基：去皮马玲薯200mg切碎煮30min，取过滤液，蔗糖10g，自来水1000ml；

B培养基：麸皮50g，蔗糖10g，KH₂PO₄0.5g，MgSO₄0.2g，自来水1000ml；

C培养基：花生饼粉50g，蔗糖10g，KH₂PO₄0.5g，MgSO₄0.2g，自来水1000ml；