[发明专利]烟草用高效固氮菌肥及其生产方法

说明书

技术领域

本发明属于固氮菌肥技术领域，具体涉及一种烟草用的高效固氮菌肥及其生产方法。 

背景技术

生物固氮在自然界氮素循环和人类的农业生产中具有十分重要的作用，每年地球上生物固氮量约为1.75亿吨，相当于地球上可利用氮源(生物固氮、化学固氮、闪电等非生物自然条件形成的氮化合物)的2/3。 

生物固氮研究始于19世纪。1838年，法国Boussingault通过田间试验和化学分析，最先确认三叶草和豌豆能够从空气中获得氮素。此后俄国的M.C.沃罗宁和德国的H.黑尔里格尔相继证明了豆科植物与根瘤菌之间的共生关系。1885年，Berthelot通过盆钵试验首次证明了微生物能够固定空气中氮素使土壤肥沃。1888年，荷兰的Beijerink首次从根瘤中分离出固氮微生物的纯培养体，后曾被其他研究者用作接种剂。俄国Winogradsky(1894)第一次从土壤中分离出巴氏梭菌的纯培养。之后，Beijerink(1901)分离出固氮菌的纯种。迄今已确认有固氮作用的微生物约有50个属90多种。包括细菌、放线菌和蓝藻，都属原核生物，根据其生物固氮形式可分为自生固氮、联合固氮、和共生固氮3种。 

自生固氮微生物是指能够在自由生活状态下固氮的微生物总称。在自然界，自生固氮微生物种类很多，包括光合细菌红螺菌、红硫细菌和绿硫细菌等，非光合细菌梭状芽孢杆菌、贝捷林克氏固氮菌、固氮螺菌、无色杆菌、多粘芽孢杆菌、克鲁伯氏杆菌和肠杆菌等。 

有些自生固氮微生物在特定植物根际环境中生长、繁殖比非根际土壤中旺 盛得多，这是由于植物根系的分泌物和脱落物提供能源物质，固氮微生物利用这些能源物质生活和固氮，这种互利关系称之为联合固氮。联合固氮最先是在雀稗和雀稗固氮菌之间发现，后来发现小麦、水稻和C4作物如甘蔗、玉米、高粱等禾本科植物亦存在联合固氮体系。能够进行联合固氮的微生物种类较多，似乎没有什么特异性，有些微生物既可以在自生条件下进行自生固氮作用，又能在田间与一些禾本科作物进行联合固氮作用。已经报道过的联合固氮的主要微生物种类有：浸麻芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、巴西固氮螺菌、含脂固氮螺菌、克鲁伯氏杆菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌和粪产碱杆菌等。 

共生固氮微生物是指能与宿主植物形成特定固氮组织结构的一类微生物。已知的比较清楚的共生体系有豆科植物-根瘤菌、非豆科植物-固氮放线菌和红萍-固氮蓝藻。 

自生固氮菌、联合固氮菌和共生固氮菌剂用作菌肥在农业生产中均有应用，但在烟草生产中的应用还未见报道。 

发明内容

针对现有技术的上述情况，本发明要解决的技术问题是提供一种烟草用高效固氮菌肥，提高土壤肥力和烤烟产量，增加上等烟率。同时，还提供生产这种烟草用高效固氮菌肥的方法。 

本发明的技术方案是： 

一种烟草用高效固氮菌肥，包括吸附剂和菌悬液，菌悬液中含有无色杆菌ZQ305(Achromobacter sp.ZQ305)，即无色杆菌ZQ305 CGMCC No.3533。 

所述的吸附剂为草炭、活性碳、蛭石或它们中的混合物。所述的吸附剂为粉碎至60-80目的草炭，草炭的含水量为10-20％。所述的高效固氮菌肥中，每400-600g吸附剂中加入100ml菌悬液。 

所述的菌悬液的制备方法为： 

(1)选取菌种  无色杆菌ZQ305 CGMCC No.3533； 

(2)斜面菌种培养，培养方法：26-30℃ 培养2-3d； 

(3)摇瓶种子培养，培养方法：500ml三角瓶装培养基100ml，121℃灭菌30-40min，冷却后接入1环斜面菌种，28-30℃振荡培养，摇床转速190-210rpm，培养时间26-30h； 

(4)发酵，培养方法：400L发酵罐装培养基280L，121℃灭菌30-40min，冷却后接入28L种子培养液，28-30℃振荡培养，搅拌转速250-270rpm，通风比1∶(0.5-0.8)，培养时间48-50h；所得即为菌悬液。 

所述的步骤(2)斜面菌种培养的培养基是：甘露醇6-15g、KH₂PO₄ 0.1-0.5g、MgSO₄·7H₂O 0.1-0.5g、NaCl 0.1-0.5g、CaSO₄ 0.1-0.5g、CaCO₃ 3-9.0g、蒸馏水900-1200ml、pH6.0-9.0；