[发明专利]薄层色谱法鉴别白术药材的方法

说明书

技术领域

本发明涉及鉴别白术药材的方法，尤其是采用薄层色谱法鉴别白术药材的方法。属于中药药材鉴别技术领域。

背景技术

中药白术为菊科植物白术(Rhizoma atractylodis macrocephala Koidz.)的干燥根茎，收载于《中国药典》2010年版，一部。是著名的传统多用途常用中药，为“浙八味”之一。具有健脾益气、燥湿利水、止汗安胎之功效。国内多个省份有种植，浙江省是主产省份之一，我省年产量近5000吨，国内外市场年需量约为8000吨，我省占全国总产量的近一半。

白术中分离得到苍术酮后，又已从白术中，分离出白术内酯类成分——白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ(黄宝山，白术内酯的分离鉴定.植物学报，1992，34(8)：614)，药理学研究表明，白术内酯类成分(白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ)为白术的抗炎、抗癌有效成分，苍术酮也具有调节胃肠道功能和促进营养物质吸收的作用(汤得芳，郝玉珩，刘佐雅等，平江白术根茎挥发油的成分及其抑瘤作用研究，药学通报，1984，19(9)：43)。相关实验研究证明上述成分是白术的药效活性成分，同时也是白术区别于其他药材的特征性成分。目前对上述三种有效成分，中国药典2010年版一部白术鉴别项下规定了以白术对照药材为对照，进行白术的鉴别，其指标成分一桃红色斑点即为苍术酮。有以白术内酯Ⅲ为单一指标，进行白术薄层色谱鉴别方法研究的报道(叶燕、程雪梅等，白术药材的薄层色谱鉴别研究，时珍国医国药，2009，20(7)：1702)。以单一成分为指标的薄层鉴别方法，存在不足之处，主要在于鉴别依据不够充分，无法准确地区分白术及其易混淆品-苍术。

鉴于目前未见以三种成分为指标的薄层鉴别方法，药典(2010年版，一部)中白术鉴别项下无白术内酯鉴别指标。故发明一项既能够快速准确地进行白术药材的鉴别，尤其是与易混淆品-苍术的鉴别。同时在某种程度上能够反映药材的品质。具有重要的学术研究价值及实际应用的价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种薄层色谱法鉴别白术的方法，以白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ及苍术酮为指标成分，通过溶剂展开与显色等程序，实现白术药材的鉴别，达到准确使用药材，严格区分其他混淆品的目的。

本发明的薄层色谱法鉴别白术药材的方法，包括以下步骤：

1)对照品溶液的制备：

称取苍术酮置于刻度试管中，加甲醇使苍术酮充分溶解，摇匀，配制质量浓度为1mg/ml的苍术酮对照品溶液；

称取白术内酯置于刻度试管中，加甲醇使白术内酯Ⅰ充分溶解，摇匀，配制质量浓度为1mg/ml的白术内酯Ⅰ对照品溶液；

称取白术内酯Ⅲ置于刻度试管中，加甲醇使白术内酯Ⅲ充分溶解，摇匀，配制质量浓度为1mg/ml的白术内酯Ⅲ对照品溶液；

2)药材供试品溶液制备：

称取干燥白术样品，置于锥形瓶中，加10倍样品重量的甲醇，超声提取，用滤纸过滤，滤液于室温自然挥发至白术药材含量为1g/ml，得白术药材供试品溶液；

称取干燥苍术样品，于锥形瓶中，加10倍样品重量的甲醇，超声提取，用滤纸过滤，滤液于室温自然挥发至白术药材含量为1g/ml，得苍术药材供试品溶液。

3)用微量点样器分别吸取上述制得的苍术酮对照品溶液、白术内酯Ⅰ对照品溶液、白术内酯Ⅲ对照品溶液、白术药材供试品溶液及苍术药材供试品溶液各2μl，依次手工点样于同一硅胶G薄层板同一水平线的不同位置上。

4)取乙酸乙酯和60-90℃的石油醚，按照体积比1∶50混合均匀，得到展开剂一，置干燥洁净双槽层析缸的第一个槽中；

5)将步骤3)的硅胶G薄层板，置于步骤4)双槽层析缸无展开剂的第二个槽中，密闭缸盖，预饱和10-15分钟后，将上述双槽层析缸第一个槽中的展开剂一转移到放有硅胶G薄层板的第二个槽中，进行上行展开，展距8cm，结束展开，取出薄层板，晾干。

6)取环己烷与乙酸乙酯，按照体积比3.8∶1混合均匀，得到展开剂二，置于步骤5)双槽层析缸已清空的第一个槽中；

7)取步骤5)晾干的硅胶G薄层板，置于步骤6)双槽层析缸无展开剂的第二个槽中，密闭缸盖，预饱和10-15分钟后，将上述双层层析缸第一个槽中的展开剂二转移到放有硅胶G薄层板的第二个槽中，进行上行展开，展距5cm，结束展开，取出薄层板，晾干。

8)配制显色剂：取无水乙醇，用移液管量取无水乙醇1/9体积量的浓硫酸，浓硫酸质量浓度为98％，将移液管伸至无水乙醇液底部加入浓硫酸，混合均匀得显色剂，将显色剂置于浸渍槽或电动喷雾器中备用。