[发明专利]一种从落叶松加工剩余物粗提物中分离纯化紫杉叶素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种通过利用树脂富集，硅胶柱层析分离纯化落叶松加工剩余物粗提物中紫杉叶素的方法。

背景技术

紫杉叶素(Taxifolin)，又名花旗松素、黄杉素、二氢槲皮素、双氢槲皮素和蚊母树素。它是一种二氢黄酮醇类化合物，学名为5，7，3’，4’-四羟基二氢黄酮醇。其分子式为C₁₅H₁₂O₇，分子量为304.25。紫杉叶素是一种无色针状结晶(50％乙醇)，白色或淡黄色粉末，易溶于乙醇、乙酸、沸水，微溶于冷水，不溶于苯。其熔点为240～242℃，旋光度+42°(c＝1.0，丙酮)。它的主要来源除了松科植物松[Pseudotsuga taxifolia Britt.(Douglas fir)]之外，还有金缕梅科植物蚊母树(Distylium racemosum Sieb.et Zucc.)、刺玫蔷薇及水红花子等。紫杉叶素已在俄罗斯通过相关部门的验证和鉴定并投入使用，是俄罗斯宇航员长期服用的保健品。

在植物中紫杉叶素以苷元或苷两种形式存在，如从Genista corsica中分离出的紫杉叶素苷元，从Ochnabeddomei中分离出tanxifolin-3-O-rhamnoside苷。在一些植物中，紫杉叶素母核羟基被甲基化，如：5-methoxytaxifolin。紫杉叶素最早由日本学者Fukui从针叶植物Chamaecyparisobtusa(Sieb.et Zucc.)Endl.叶中提取出来，为一种葡萄糖苷的苷元。随后他又研究了它的3-O-葡萄糖苷在针叶植物中的分布以及细菌存在下苷键的水解。以后又有人从多种植物中分离出花旗松素及其衍生物。

紫杉叶素能从人体中有效地消除过量的自由基，促进毛细血管的渗透性，改善免疫功能，减少癌症的形成，能防止心血管疾病，它有恢复毛细血管的弹性，阻止发炎和肿块的形成。同时它还是高效的天然食品抗氧化剂，紫杉叶素的抗氧化剂作用超过其它诸如槲皮素、芸香苷和合成抗氧化剂等。除此之外，它还具有保护肝脏，視力功能，以及抗糖尿病等一系列的功效。在长期口服用紫杉叶素的情况下，有利于保持身体免疫力系统的机能及抗毒素的作用。在俄罗斯2003年药典中介绍了紫杉叶素在人的循环系统治疗，受到照射，放射性核素后的治疗，延缓人体老化，糖尿病以及在预防和治疗肿瘤都有比较好的疗效作用。

在制药业，其可用于生产药剂，能够治疗缺血性心脏病、缺血性动脉粥样硬化、肝活动障碍、糖尿病等；在食品制造业方面，把紫杉叶素加入到植物油、动物脂肪、干奶粉、含脂肪的糖果点心食品中，可以延长其有效期2～3倍，并且在此情况下，可以使食品明显的表现出改善的性能；在工业方面，它可用于火箭原料和碳氢化合物原料的稳定剂、发电机油和工业油的稳定剂。

我国拥有丰富的兴安落叶松资源，因其木材在家具制造、建筑业和铁路建设等方面具有广泛的用途，所以每年都会产生大量木材加工后废弃的木屑，其中绝大部分都被视为垃圾扔掉。兴安落叶松中含有紫杉叶素、阿拉伯半乳聚糖及原花青素等成分，它们都具有良好的生物活性，其中紫杉叶素具有极好的自由基清除能力，将其加入到糖果点心食品中，可以延长有效期2～3倍，因此是一种纯天然的食品防腐剂。利用兴安落叶松加工后废弃的木屑提取分离紫杉叶素并将其开发成食品添加剂，不但可以充分合理地利用木材资源，还可以将其附加值充分的开发出来，使东北的资源优势转化为经济优势，从而带动地方经济的发展。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用落叶松加工剩余物的粗提物为原料，通过树脂吸附对其中的紫杉叶素进行富集，再通过硅胶柱层析的方法对紫杉叶素进行纯化的工艺方法。本方法不仅可以获得高纯度的紫杉叶素产品，还可提高林业资源的利用率。

一种从落叶松加工剩余物的粗提物中提取纯化生物活性成分紫杉叶素的方法，其主要特征在于：将落叶松加工剩余物的粗提物加入到乙醇中，搅拌充分溶解，加入AB-8大孔树脂。将此溶液放置在40℃水浴锅上至乙醇挥发至干，吸附样品后的树脂，加入到填装好的AB-8树脂柱上，用不同浓度的乙醇溶液进行洗脱，收集含有目标产物的馏分。后经过正相硅胶柱层析进一步纯化，得到纯度为94.35％以上的紫杉叶素。

本发明选取的落叶松加工剩余物的粗提物来源如下：主要来源包括在中国分布较广的兴安落叶松、华北落叶松、西伯利亚落叶松、红杉和大果红杉等植物加工利用后木屑的水或醇提取物浸膏。