[发明专利]三次连续发酵生产高尔夫球场草坪缓释生物有机肥制备工艺

权利要求书

1.一种三次连续发酵生产高尔夫球场草坪缓释生物有机肥制备工艺，其特征是：其中一次发酵过程是利用养殖猪舍内的垫料中加入具有很强降解能力和出臭能力的：芽孢杆菌、乳酸菌、球菌对猪的粪便及猪尿进行一次发酵；二次发酵是在一次发酵的基础上对经过一次发酵的猪粪便及其垫料进行二次剁堆发酵并在其中加入具有很强分解能力的乳酸菌的发酵液；三次发酵是在二次发酵的基础上在发酵产物中加入硅酸盐细菌的发酵液，制得的高档高尔夫球场草坪缓释生物有机肥颗粒：其中硅酸盐细菌的活菌数10¹³/克，有机质＞30％，大肠杆菌＜5/克，蛔虫死亡率＞98％，有效微生物高达10¹³/克：

具体步骤：

A：发酵床制作：

(1)EM菌种(在市场上购买优质EM菌种)的活化：用EM菌种10克、红糖0.1公斤(红糖先用热水溶化)，加入1公斤的水，在37℃条件下，培养12h；

(2)制作发酵床：按照10％的接种量在猪舍垫料中加入EM菌液，用搅拌机充分搅拌均匀，后加入到猪舍发酵床内，经过室温25℃作用48h，可以进行生猪养殖；

B：自然发酵：在室温25摄氏度条件下，猪排泄的粪便尿液经过猪自身活动和人工上下翻动后会与垫料混合均匀，自然发酵的时间持续比较长，一般在1年到2年之间。自然发酵具有很强有效的除臭和杀菌杀虫功能。

C：乳酸菌活菌发酵剂制备：

1)制备一次扩大培养培养基，其培养基的配方如下：大豆蛋白胨50g，牛肉粉30g，酵母粉30g，葡萄糖200g，乳糖200g，蒸馏番茄汁50ml，水1000ml，在温度121℃高压蒸汽灭菌20min待用；

2)一次扩大培养将一次培养的培养基装到2000ml三角瓶中，在三角培养瓶加入乳酸菌菌粉5g，乳酸菌活菌数10⁹/g其中分别含有植物乳、杆菌、德氏乳杆菌、乳酸乳球菌、双歧杆菌及活性淀粉酶，36±1℃厌氧静止培养16～18h，当发酵液ph值达到3.8-4.5时，表明发酵状态良好；

3)配制二次扩大培养大豆蛋白胨1000g，棉籽糖100g，番茄汁500ml，氯化钠50g，水10000ml，121℃条件下高压蒸汽灭菌20min待用；

4)二次扩大培养：将二次培养的培养液加入到发酵罐中，接种一次发酵的发酵液到二次扩大培养培养的培养液中，厌氧静止培养，温度40℃，培养12-14h，当发酵液ph值达到3.8-4.5时，表明发酵状态良好；

D：乳酸菌厌氧发酵：在自然发酵得到的发酵物中接种乳酸菌发酵剂，接入量按需二次发酵量的2％接入乳酸菌发酵剂，混合均匀，用推土机将混合好的需二次发酵的发酵物推到用砖和水泥砌成的密封的发酵窖中，保持室温25℃，厌氧发酵36h，经过乳酸菌厌氧发酵剂发酵，即可以有效地杀灭猪粪便中的大肠杆菌及蛔虫，提高生物有机肥的微量元素含量又可以有助于有机大分子转化为小分子便于植物吸收的同时有效地调节有机肥的酸碱性；

E：硅酸盐细菌发酵液制备

1)硅酸盐细菌一次培养基配制：

培养基的配方如下：蔗糖5g，磷酸二氢纳(Na2HPO4)2g，七水硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5g，氯化铁(FeCl3)0.005g，碳酸钙(CaCO3)0.1g，铝土矿0.5g，水1000ml，pH 70～7.5 121℃高压真气蒸汽灭菌20min，待用；

2)硅酸盐细菌一次扩大培养将一次培养培养基10ml分装到容积为100ml三角瓶中，在每个培养瓶中分别挑取硅酸盐细菌在本发明中选取的是巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌菌种，挑取巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌菌种(购自中国菌种典型培养物保藏中心经紫外线诱变处理后分离得到的产磷产钾能力强的菌株)斜面上的一个单菌落，摇床在37℃培养24h；

3)硅酸盐细菌二次扩大培养培养基；

培养基配方如下：玉米0.5％，鱼粉0.5％，豆柏3.5％，去离子水95.5％121℃，高压真气蒸汽灭菌20min，待用；

4)硅酸盐细菌二次扩大培养将二次培养培养基装入发酵罐中，在37℃在摇床上(200rpm/min)培养24h；

5)硅酸盐细菌发酵猪粪将硅酸盐细菌发酵液按2％接种量接种到二次发酵的发酵物中，混合均匀，待用；

F：制备生物有机肥粒：将经过硅酸亚细菌发酵的发酵产物：利用粘米汤作为调节湿度的调和剂，将粘米汤与硅酸盐细菌发酵的产物混合均匀湿度在10％左右，这样便于干燥制粒，接着采用制粒机制粒，然后在45摄氏度下干燥，即得产品。