[发明专利]一种超声强化提取及分级纯化芦笋皂苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生化工程技术领域，具体地，涉及一种超声强化提取及分级纯化芦笋皂苷的方法。

背景技术

芦笋(Asparagus officinalis)是一种具有保健功效的名贵蔬菜，被誉为世界十大名菜之一，以嫩茎供食用，质地鲜嫩，风味鲜美，柔嫩可口，在国际上有“蔬菜之王”的美称，在欧洲其消费量仅次于番茄、青刀豆、蘑菇和豇豆。被世界卫生组织列为世界十大最具有营养价值的蔬菜之首，是国际上公认的防癌保健蔬菜。目前，芦笋的消费量和种植面积逐年快速增长，其下脚料的利用也就变得意义重大。

芦笋含有多种对人体有益的成分，其中皂苷是其主要的活性成分之一。国内外学者研究了芦笋中皂苷类成分，目前，在芦笋中已经提取分离得到了十几种皂苷单体。国外许多文献指出甾体皂苷类化合物是主要的抗癌成分。

目前，对芦笋皂苷的提取已经取得了一些研究进展。安玉会等对芦笋用正丁醇为提取溶剂并利用硅胶柱层析进行纯化，得到Rf(Remove Factor)分别为0.72和0.26的两种物质(河南医科大学学报，1998，33(4)：14-15)。方幼兰用95％乙醇，液料比(V/W)6∶1，90℃下提取4小时，分别从新鲜和干燥的芦笋样品中提取得到了皂苷，平均得率分别为1.70％、4.01％，并利用氧化铝进行了柱层析分离，并对分离得到的皂苷进行了结构与性质的分析(生物工程学报，2005，21(3)：446-450)。刘杰采用正交试验对芦笋下脚料中皂苷的提取条件进行了优选，其最优提取条件为85℃下加入35倍量70％乙醇，回流提取两次，每次0.5小时。按照该提取条件其提取率为4.11％(光明中医，2008，(23)11：1672-1676)。另外，黄云祥(公开号，CN1793165A)公开的方法中以乙醇为介质对芦笋皂苷进行提取，并用沉淀剂除杂，进一步利用AB-8、X-5、NAK-9进行纯化。最终得到的皂苷纯度达到81.1％。瞿伟菁(公开号，CN101559157A)公开的方法中同样采用乙醇为提取剂，提取物再经过萃取和大孔树脂纯化，终产品皂苷纯度达到50-60％，得率仅为0.5-0.6％，张立伟(CN101474350A)公开方法中的提取剂也为乙醇，其提取率为1.9-2.5％，得到的产品经大孔树脂进行纯化，纯度最高为42.0％。目前，芦笋皂苷均是采用常规溶剂浸提法进行提取，存在的主要问题是提取温度高、提取时间长、提取能耗高、提取物中皂苷含量较低，限制了其应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种超声强化提取及分级纯化芦笋皂苷的方法。

根据本发明的超声强化提取及分级纯化芦笋皂苷的方法，包括以下步骤：

1)将芦笋下脚料粉碎，筛分，加入乙醇，在超声提取设备中进行强化提取，经液-固分离得到芦笋皂苷提取液，提取液减压蒸馏回收乙醇后得浓缩液；

2)将步骤1)得到的浓缩液加入水饱和正丁醇进行萃取，得到萃取液，将萃取剂减压回收，得到初步纯化的浸膏；

3)将步骤2)得到的浸膏配制成水溶液，通入空气进行泡沫分离纯化，回收得到的泡沫；

4)将步骤3)得到的泡沫进行减压蒸馏，得到的浸膏配成水溶液，调节pH，并上样至大孔树脂，收集洗脱液，进行干燥处理即得高纯度芦笋皂苷。

根据本发明的方法，超声波具有快速破碎细胞、强化胞内物质释放和扩散的作用；而选择适当的大孔树脂可以提高分离皂苷的纯度，本发明的发明人经过大量筛选，发现在本发明的超声强化提取及分级纯化芦笋皂苷的方法中使用大孔树脂ADS-7或HP-20能够显著提高分离的芦笋皂苷纯度；另外，由于纯化过程中采用分级纯化方式进行，可以得到不同含量的产品，以满足不同生产需求。

根据本发明的超声强化提取及分级纯化芦笋皂苷的方法，其中，在步骤2)中，浓缩液与水饱和正丁醇的体积比为1∶0.3-1∶1。

根据本发明的超声强化提取及分级纯化芦笋皂苷的方法，其中，在步骤4)中，上样体积与所用大孔树脂体积的比值为0.2-2。

根据本发明的超声强化提取及分级纯化芦笋皂苷的方法，其中，在步骤1)中，提取所用乙醇浓度为50-90％；固液比为1∶5-1∶20W/V。

根据本发明的超声强化提取及分级纯化芦笋皂苷的方法，其中，在步骤3)中，进行泡沫分离纯化所用的溶液浓度为2-20mg/ml，泡沫纯化的空气流速为20-40L/h。

根据本发明的超声强化提取及分级纯化芦笋皂苷的方法，其中，在所述步骤4)中，上样浓度为20-200mg/ml，pH值为5-8，吸附流速为0.5-2.5ml/min。