[发明专利]气相色谱/质谱联和高效液相色谱测定中药里安定成分的方法

说明书

技术领域

本发明属于一种测定中药里安定成分的方法，具体涉及一种气相 色谱/质谱联和高效液相色谱测定中药里安定成分的方法。

背景技术

目前世界上，有不少神经疾病患者。其表现是较严重的焦虑、失 眠、惊厥、癫癎等。他们常常需要使用一些安定情绪的药品。治疗神 经疾病的药物有几十种。其中，西药是化学合成的，有一定组成结构 和较固定的分析方法。我国是中药发源地，中药来源丰富，常常也有 较好的疗效。但目前许多中药的成分不为人知，严重影响它的利用。 为保护和开发我国的中药资源，建立一些现代化的分析方法，搞清楚 中药的成分是有必要的，经检索，未发现对中药里安定成分的测定方 法的文献报导。

发明内容

本发明的目的是提供一种采用溶剂抽提，气相色谱/质谱联合高 液相色谱的对中药里安定成分的测定分析法。

本发明所指中药里安定成分是指具有一定结构的，与西药对应的 对神经有稳定作用的成分。

本发明具体的测定分析法包括如下步骤：

一、测定仪器和实施条件：

①.Waters Breeze 1525高效液体色谱仪，美国制造，仪器配有Waters 1525Binary高效液体色谱泵，Dualλ2487紫外检测器，色谱柱型 号为VP-ODS SHIMADZU，4.6x150mm，3个色谱柱，日本制造，分 析中以3个色谱柱串联使用，色谱流动相为乙醇，流速0.6毫升/分， 色谱柱压为2400PSI，柱温14℃，紫外波长选在254nm；

②菲尼根跟踪气相色谱/质谱(GC-MS)分析仪由美国菲尼根公司提供， 气相色谱/质谱分析的条件：色谱柱是一个DB-5MS柱，30米长，0.25 毫米内径，薄膜厚度为0.25毫。载气为氦气1.0ml/min，初始温 度为70℃，保持4分钟，然后以10℃/分钟上升率，最后加热至250 ℃，停留3分钟，电子轰击为70电子伏，原子质量范围为30-350；

③试剂和样品

试剂乙醇为分析纯试剂，由天津市博迪化工有限公司生产； 中药：路路通，云南制药厂生产；枣仁安神颗粒，黑龙江济仁药业有 限公司生产；

外标物为西药(说明书中具有安定作用)：纯舒乐安定，其来自 艾司唑仑片(Estazolam Tablets)，化学名为6-苯基-8-氯-4H- 〔1，2，4〕-三氮唑〔4，3-α(1，4)苯并二氮杂卓定，天津太平洋制药 有限公司生产；纯氯硝安定，来自氯硝西泮片(Clonazepam Tablets)， 化学名为1，3-二氢-7-硝基-5-(2-氯苯基)-2H-1，4-苯并二氮杂卓-2- 酮，由江苏恩华药业股份有限公司生产；

二、中药中安定成分的分析方法

(1)中药成分的抽提和制备

将中药研磨成粉末，称取0.1-0.5克，将其置于50毫升三角瓶中， 加入50毫升乙醇，将三角瓶置于超声波设备中，进行1小时处理，再 放置24小时，过滤，以清液进行仪器分析；

(2)中药中安定成分的定性分析

(一)、色谱/质谱(GC/MS)定性

①色谱保留值定性法：在相同的色谱条件下，中药分离谱图中的组分， 若其色谱保留时间和对应的纯试剂的色谱保留时间是一致的，说明中 药具有对应外标物的安定成分；若其色谱保留时间和对应的纯试剂的 色谱保留时间不同，说明中药不具有对应外标物的安定成分；

②质谱比较定性法：中药分离谱图中的组分，若其质谱特征图和所对 应的纯试剂的质谱特征图是基本一致，即其质谱图的质荷比(m/z) 相同，并具有较高的匹配度，说明中药具有对应外标物的安定成分。 若其质谱特征图和对应的纯试剂的质谱特征图不同，说明中药不具有 对应外标物的安定成分；

关于GC/MS定性的补充说明：通常，对一个未知物的分离谱图的每 个色谱峰，GC/MS仪器都可以给出可能的化合物，和相应的匹配度。 有时候，这种定性是亦是准确的，甚至不需要纯试剂再核实。但本工 作对所确定的组分还以纯化合物进行了再核实。因为这种多种定性总 是更为准确，周全。