[发明专利]自动分析装置

说明书

技术领域

本发明涉及在以血液、血清或血浆为试样或检测体、并利用抗原抗体反应进行血中微量物质的分析时，以了解是否反应及反应量为目的而使用与抗原或抗体结合的荧光体或发光体的抗原或抗体的分析方法。

背景技术

在以血液、血清、血浆或体液为试样或检测体，进行激素、肿瘤标志物、传染病病原体标志物、传染抗体等微量物质的计测分析时，一般采用对于蛋白质的每个分析项目，通过基于抗原抗体结合反应的结合，定性地或定量地检测试样或检测体中的蛋白质等的方法。在该场合，与分析对象的蛋白质结合的抗体或抗原结合放射性同位素、荧光色素、发光色素、酶、稀土类络合物、金属离子等，并且被称为标记抗原、标记抗体或示踪物等。

同样地，在想要对试样或检测体中的病原体、药物代谢标志物等DNA或RNA进行计测分析时，在分析对象物的DNA或RNA上接合互补的DNA链或RNA链来检测分析对象物。此时，互补的DNA链或RNA链直接或间接地被荧光体或发光体标记。

免疫学分析法是以抗原和与抗原结合的抗体产生抗原抗体结合为基础的生物体物质的特殊的测定方法。根据其测定原理，有溶液内沉淀反应法、利用载体的凝聚反应法、标记抗体法。溶液内沉淀反应法是在溶液内光学地测定通过抗原抗体结合而产生的凝聚物并定量的方法，已知有免疫比浊法、免疫浊度法等。利用载体的凝聚反应法是使以抗体为固相的胶乳等载体与试样溶液(抗原)进行抗原抗体结合，并光学地或图像地测定所生成的载体的凝聚并定量的方法，是根据胶乳比浊法、胶乳浊度法、粒子计数、图像处理等测定外观的粒子直径或透射光的减少及增加的方法。标记抗体法是使用以各种标记物质标记的抗体进行抗原抗体结合，并只测定与标记抗体反应的成分的方法，根据该标记物质，已知的有放射免疫测定、酶免疫测定、荧光免疫测定、化学发光免疫测定、电化学发光免疫测定等。

对免疫学分析法存在的问题点列举出以下几点。

1.由异嗜性抗体产生的影响：在作为抗体使用单克隆抗体的系统中，若在试样中存在HAMA(human anti-mouse antibody)，则使标记抗体与固相抗体交联，产生假阳性。

2.与封闭剂等的非特殊的反应：试剂中所含有的封闭剂及保护性蛋白质与试样中的物质反应，产生假阳性。

3.与标记酶的非特殊的反应：若在试样中存在与标记酶结合的物质，则背景提高。

4.前带现象或high dose huck：在抗原浓度为测定范围以上的场合、或标记抗体浓度大大地超过装置的测定范围的场合产生假阳性。在抗原过剩区域，抗原抗体复合物为可溶性，有时显示异常低值。

5.溶血的影响：若试样的溶血强烈，则对判定的显色有影响，难以判定。

6.在试样为粪便、尿等的场合：使用新鲜的试样。含有强度的混浊尿或血球的试样是不合适的。

7.由试样的性质产生的影响：在试样的粘性、尤其蛋白质浓度高的场合(M蛋白、冷球蛋白阳性检测体)等反应速度慢，产生假阴性。使用稀释的试样再次进行试验。有时因脂血血清或免疫复合物的存在而产生非特殊的散射。

8.由交叉反应产生的假阳性和假阴性：由使用重组抗原的系统识别。另外，在FSH、TSH、LH中通过交叉反应而产生假阳性。

9.使用药物(阿托品、咖啡因、乙酰胺基苯酚、乙酸水杨酸、维生素C等)的影响：在尿中hCG测定系统中受到影响，产生假阳性。

10.测定灵敏度的试剂间差异：有在规定的判定时间内是阴性，但若经过一段时间则出现阳性反应的症状。

维森及耶洛将放射性同位素标记在抗原或抗体上，实现放射免疫测定，从此之后已历经多年。由于其灵敏度好及特殊性高，因此即使现在也作为有用的方法而使用。另一方面，在此期间，开发并改进了酶免疫测定法、荧光免疫测定法、发光免疫测定法等。

酶免疫测定法是代替放射性同位素而在抗原或抗体上标记酶的方法，因为酶所具有的对基质的催化活性高，因此可实现高灵敏度的测定。

开发出如下时间分解荧光测定法：对抗原抗体反应最终产物脉冲照射激发光，经过由反应容器等产生的荧光消光的时间后，测定该物质的荧光。近年来，开发出铕络合物或钐络合物等荧光消光时间比较长的物质或不需要敏化剂的物质，从而使该方法更有效。

在发光免疫测定法中，包括标记异鲁米诺或吖啶酯并测定发光量的方法，并且构筑了使用如下组合的测定系统，即，标记物质是酶，但作为基质使用能够得到发光反应的物质的过氧化物酶与鲁米诺的组合，或者去掉磷酸基则发光的AMPPD等基质与碱性磷酸酶的组合，或者作为标记物质使用荧光素酶，基质使用荧光素的组合。