[发明专利]用于生产核黄素的方法

权利要求书

1.经修饰的生产核黄素的微生物，其特征在于，与未经修饰的野生型微生物相比，CcpC型转录因子的表达和/或活性被降低，优选地被降低至少25％。

2.如权利要求1所述的微生物，其特征在于，其包含处于被CcpC型转录因子调节的至少一个基因的一个或多个结合序列中的至少一个突变，优选地处于citZ和/或citB基因的结合序列中的至少一个突变。

3.如权利要求2所述的微生物，其特征在于，其包含处于根据SEQ ID Nos.：3、4、5、6、7的序列或其片段中，特别是SEQ ID Nos.：8、9、10、11、12、13、14或15中的至少一个突变。

4.如权利要求1或2所述的微生物，其特征在于，编码Ccpc的基因被敲除。

5.如权利要求1或4所述的微生物，其特征在于，包含选自下组的核酸分子，所述组由以下组成：

a)包含核苷酸序列SEQ ID No.：1或由核苷酸序列SEQ ID No.：1组成的核酸分子；

b)编码下述多聚氨基酸分子(蛋白质)的核酸分子，所述多聚氨基酸分子包含氨基酸序列SEQ ID No.：2或由氨基酸序列SEQ ID No.：2组成；

c)与a)或b)的核酸分子具有至少70％同源性的核酸分子；

d)在严格条件下与a)或b)的核酸分子之一杂交的核酸分子；和

c)根据a)或b)的核酸分子的片段和/或类似物，其编码具有CcpC型转录因子功能/活性的蛋白质，

其中根据a)到c)的核酸分子具有至少一处下述遗传突变，所述遗传突变导致与CcpC野生型的活性相比降低的、优选地降低至少25％的CcpC蛋白质活性。

6.根据权利要求1到5中任一项所述的微生物，其特征在于，与未经修饰的微生物或野生型微生物相比具有提高至少10％的核黄素产率。

7.根据前述权利要求中任一项所述的微生物，其特征在于，选自由以下组成的组：Bacillus、Corynebacterium和Pseudomonas，优选地Bacillus anthracis、Bacillus cereus、Bacillus stearothermophilus、Bacillus halodurans、Bacillus amyloliquifaciens或Bacillus subtilis。

8.根据前述权利要求中任一项所述的微生物用于与未经修饰的微生物或野生型微生物中的核黄素合成相比提高核黄素合成、特别是提高至少10％的用途。

9.编码CcpC型转录因子的经修饰的核酸分子的用途，其特征在于，所述修饰导致转录因子功能的降低，优选地导致至少25％的降低，特征在于要被修饰的核酸分子选自由以下组成的组：

a)包含核苷酸序列SEQ ID No.：1或由核苷酸序列SEQ ID No.：1组成的核酸分子；

b)编码下述多聚氨基酸分子(蛋白质)的核酸分子，所述多聚氨基酸分子包含氨基酸序列SEQ ID No.：2或由氨基酸序列SEQ ID No.：2组成；

c)与a)或b)的核酸分子具有至少70％同源性的核酸分子；

d)在严格条件下与a)或b)的核酸分子之一杂交的核酸分子；和

c)根据a)或b)的核酸分子的片段和/或类似物，其编码具有CcpC型转录因子功能/活性的蛋白质。

10.经修饰的核酸分子的用途，其特征在于，所述修饰导致CcpC型转录因子功能的降低，优选地导致至少25％的降低，特征在于要被修饰的核酸分子选自所述转录因子的结合序列。

11.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述经修饰的核酸分子选自由SEQ ID Nos.：3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14和15组成的组。

12.用于生产核黄素的方法，其特征在于所述方法包括培养根据权利要求1到7中任一项的微生物。

13.用于生产核黄素的方法，其特征在于包括步骤：

a)提供根据权利要求1到7中任一项所述的合适的宿主细胞，

b)在适用于核黄素生产的发酵条件下培养，和

c)将核黄素与培养基和/或经修饰的宿主细胞分离。