[实用新型]一种无边缘效应的96孔细胞培养板

说明书

所属技术领域

本实用新型涉及生物学中培养细胞使用的细胞培养板，细胞培养板，尤其是一种无边缘效应的96孔细胞培养板。

背景技术

目前，在生物学中培养细胞使用的细胞培养板，在细胞培养的过程中，经常会发生边缘效应，边缘效应是指在使用多孔板的细胞培养中，周边孔中的细胞会集中在孔的外侧，这种现象在实验中常用的96孔板中十分明显；而边缘孔的数量占到总数的1/3，这就意味着因为此误差所导致的影响相当巨大。

由于大多细胞的生长会受周围接触细胞的抑制，所以边缘效应导致边缘孔内细胞平均生长速度要比其他孔快，从而在实验过程中引入系统误差；在很多大规模药物筛选实验中，人们甚至弃去周围孔的实验结果，这就意味着每三块96孔培养板只能被当作两块板使用。

边缘效应产生的原因是由于在室温下的培养板转移到37℃培养箱后，培养板上产生的温度差影响细胞沉降引起的；为证实这一结论，有人做了两种不同的实验，第一个实验是将细胞接种后直接放入37℃培养箱，1小时后取出在显微镜下观察，发现外侧孔的大部分细胞都迁移到孔的外侧聚集生长，而不是象内部孔一样平均生长；另一个实验证据是细胞培养板在37℃条件下放置一段时间以后取出，加入细胞而不放入37℃环境，发现细胞呈相反的沉降趋势；这两点足以证明产生细胞边缘效应的决定性因素就是细胞沉降过程中内、外孔之间热动力学失衡(BETINA KERSTIN LUNDHOLT，KURT M.SCUDDER，and LEN PAGLIARO，A SimpleTechnique for Reducing Edge Effect in Cell-Based Assays.Journal of BiomolecularScreening 2003：566-570)。

目前克服该现象的方法是在培养板内分入细胞后，在室温下放置1-2个小时，让细胞在没有温度差的情况下沉降，然后再转移到37℃培养箱内，该方法至少适合CHO等在室温下能贴壁的细胞；该方法的缺陷是对于脆弱的细胞外界环境温度降低会导致细胞应激反应产生，从而改变细胞的性状，尤其是原代培养的细胞更加不能承受如此苛刻的生存条件，因此会发生细胞生长状态不佳、细胞凋亡甚至死亡。

导致目前常规的96孔细胞培养板产生边缘效应的原因是：目前应用的96孔细胞培养板外圈的孔侧壁直接与外界接触，对温度非常敏感，从而在温度波动很大时不能调控细胞的迁移；而内侧的孔由于仅从底部接触外界，细胞生长就很均匀；因此如果能够在外侧孔的侧面设计结构使其仅从底部感受外界温度变化，将会避免边缘效应的产生。

发明内容

本实用新型的发明目的是：提供了一种无边缘效应的96孔细胞培养板，该细胞培养板是通过改变原有96孔板的结构，在最外侧孔的外侧设计了不同宽度及厚度的槽形结构，达到最大程度消除边缘效应的目的，同时又保证了细胞培养的最佳状态；为了实现上述目的，本实用新型是这样实现的：一种无边缘效应的96孔细胞培养板，是由：上盖、培养板和培养板孔组成；其特征在于：培养板上有96个培养板孔，培养板孔为8×12分布，每个孔为大小、形状均相等的正圆形或方形，底端封闭，上端敞开便于培养液加入，周边有侧壁围绕孔的周围；培养板孔的高度稍高于侧壁形成的平面；在最外一圈孔与培养板侧围之间存在槽的结构；上盖平坦，与培养板上面孔形成的平面平行，有裙边，与培养板之间存在缝隙，间距为0.1-2mm；孔的分布为矩阵形，每个孔的中心距相等，距离为0.5-2cm；培养板；其中：培养板上最外一圈培养板孔与培养板侧围之间存在间隔，距离为：12孔长边侧1-4mm，8孔短边侧2-6mm；在培养板上最外一圈培养板孔与培养板侧围之间存在槽结构，该槽结构为四周连通的，四边可以设计有一条或多条的槽，或者四个转角处相连通的槽，槽的高度为0-15mm，将孔与外界从底部隔开；其中：槽的宽度为：12孔长边侧0.5-3.5mm，8孔短边侧0.5-5.5mm，槽的内径为：12孔长边侧0-3.5mm，8孔短边侧0-5.5mm，可以是实心槽，其长度覆盖周边所有的孔；槽可拆卸，或者与培养板为一体，槽可以是上端敞开的，或者上端封闭，在一处或多处有孔与外界连通.由于该细胞培养板是通过改变原有96孔板的结构，在最外侧孔的外侧设计了不同宽度及厚度的槽形结构，因此达到最大程度消除边缘效应的目的，同时又保证了细胞培养的最佳状态.

附图说明

附图一种无边缘效应的96孔细胞培养板简单示意图。

下面结合附图和实施例对本实用新型进一步说明。

具体实施方式

下面根据附图对本实用新型做进一步的说明：一种96孔细胞培养板，是由：上盖、培养板和培养板孔组成其特征在于：培养板上有96个培养板孔，培养板孔为8×12分布，每个孔为大小、形状均相等的正圆形，底端封闭，上端敞开便于培养液加入，周边有侧壁围绕孔的周围；培养板孔的高度稍高于侧壁形成的平面，形成一圈突出的槽；上盖可以平整地覆盖在培养板上，保证与每个培养板孔形成的平面平行；上盖上设计有凸起的圆圈，正好覆盖在培养板孔的上方并保持0.15mm的间距；每个培养板孔的中心距相等，距离为1cm；培养板采用透明塑料制作；其中：培养板上最外一圈孔与培养板侧围之间存在间隔，距离为：12孔长边侧1mm，8孔短边侧2mm；在培养板上最外一圈培养板孔与培养板侧围之间存在槽结构，该槽结构为四周连通的12孔长边侧3mm，8孔短边侧4mm，以达到阻隔外界与外圈孔侧壁直接接触的目的。