[实用新型]雌二醇ELISA检测试剂盒

说明书

(一)技术领域：

本实用新型涉及动物源性食品中药物残留量的检测试剂盒，特别是检测动物源性食品中雌二醇残留量的试剂盒。

(二)背景技术：

雌二醇是应用广泛的甾类同化激素，因其可以促进动物生长和提高畜禽瘦肉比，在畜禽养殖业中曾应用。雌二醇可在动物体内残留，通过食物链危害人类健康，使女性儿童提前发育，男性儿童乳腺发育呈女性化，男性生殖系统异常或引起病变，并导致女性乳腺癌和子宫内膜异位症发生率上升，且雌二醇存在明显的致癌性，欧美等发达国家已经相继禁止或严格禁止使用，中华人民共和国国务院第226号文件，《饲料和饲料添加剂管理条例》中规定雌二醇在饲料中不得检出。

目前常用气相色谱法(GC)检测，气相色谱法分析法的样本前处理及测定操作繁琐且费用较高，不适合现场监控和大量样本筛选，使推广应用受到限制。

(三)实用新型内容：

本实用新型所要解决的问题是提供一种小巧轻便的雌二醇残留检测试剂盒，其操作简便，检测快速、准确、灵敏度高，成本低，稳定性好，需要的技术含量不高，可进行一次连续多个样品中雌二醇含量的测定，减少了检测样本所需要的时间。

本实用新型的技术方案是：采用96孔聚苯乙烯试剂板作为固相载体，放入真空铝铂袋内，在试剂盒酶标板微孔条上预包被雌二醇偶联抗原制成检测板，以塑料硬膜为盖板膜，将40ml浓缩洗涤液、50ml浓缩复溶液、12ml酶标二抗、7ml雌二醇抗体工作液、7ml显色液A液、7ml显色液B液、7ml终止液和6瓶1ml梯度浓度的标准品溶液及1瓶1ml高浓度标准品溶液，试剂用不同大小、不同颜色的塑料瓶和玻璃瓶盛装并固定在泡沫塑料模具中与试剂板、盖板膜一同封装在盒内，以便于携带和运输。每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定(包括标准分析孔)，既可进行一次连续多个样品的检测，也可以将板孔拆开多次检测。检测时，样本中的残留的雌二醇药物将和酶标板微孔条上预包被的偶联雌二醇抗原竞争抗雌二醇抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光值与样本中雌二醇的残留量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中雌二醇药物的残留量，其操作简便易行。

经实验表明本试剂盒具有很高的灵敏度：鸡肉/肝、猪肉/肝、虾、鱼样品的最低检测限为5μg/kg、饲料样品最低检测限为80μg/kg、尿液样品最低检测限为2.5ug/L；饲料/组织样品的回收率为80％±15％、尿液样品的回收率为80％±10％；本试剂盒同雌二醇-3甲醚的交叉反应率为30％、同炔雌醇的交叉反应率为7％、同苯甲酸雌二醇、雌酚酮、雌三醇的交叉反应率均小于0.1％。相对于其他雌二醇残留检测方法，本试剂盒所需仪器较少，只需要酶标仪、匀质器、振荡器和微量移液器等实验室常规仪器，同类实验室一般均有配备，所需成本较低。

本实用新型的有益效果是：能快速、简便、灵敏、准确地用于雌二醇药物残留的检测。

(四)附图说明：

图1为本实用新型酶联板的侧面纵剖面图(长为8.55cm)；

图2为本实用新型酶联板的侧面横剖面图(长为12.8cm)；

图3为本实用新型酶联板的俯视图；

图4为本实用新型盖板膜平面图；

图5为本实用新型试剂瓶纵剖面平面图；

图6为本实用新型固定泡沫模具的俯视图；

图7为本实用新型盒体与固定泡沫模具的侧视图。