[发明专利]一种肌氨酸的检测方法有效
| 申请号: | 200910265395.7 | 申请日: | 2009-12-30 |
| 公开(公告)号: | CN101718746A | 公开(公告)日: | 2010-06-02 |
| 发明(设计)人: | 徐国宝;李海娟 | 申请(专利权)人: | 中国科学院长春应用化学研究所 |
| 主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
| 代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 魏晓波;逯长明 |
| 地址: | 130000 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 氨酸 检测 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种化学物质的检测方法,尤其涉及一种肌氨酸的检测方法。
背景技术
肌氨酸(Sarcosine),亦名N-甲基甘氨酸或2-甲氨基乙酸,可以由氯乙酸 与甲胺反应制得。肌氨酸通常以磷酸肌酸的形式存在于人体或动物的肌肉中, 可以提高人体的智力,增长肌肉的无氧力和爆发力。
发表在2009年2月12日《自然》杂志(Nature 2009,457:910)上的 文章指出,肌氨酸可以有效反映癌细胞的侵袭性,可辨别癌细胞的生长行为, 当研究者将肌氨酸加入良性前列腺细胞的培养基后,良性前列腺细胞便具备 了侵袭性,呈现出了癌细胞的生物学特性,由此可表明肌氨酸有可能参与了 癌变过程。因此,对肌氨酸进行快速、灵敏地检测便具有了重要的意义。
当前所使用的检测技术包括色谱-质谱联用法及毛细管电泳法等。现有技 术中,对肌氨酸的检测主要通过色谱-质谱联法实现,色谱-质谱联用法是将色 谱的分离能力与质谱的定性功能结合起来,以实现对混合物的定性分析,其 中,色谱包括液相色谱和气相色谱,但是,液相色谱和气相色谱的分离效率 较低,而与它们联合使用的质谱检测器却又价格昂贵,这样就限制了色谱-质 谱联用法的使用。
毛细管电泳(CE)法具有简单、高效、快速且样品用量少等优点,将电 化学发光应用于毛细管电泳(CE)而形成的毛细管电泳电化学检测技术已成 为一种理想的检测技术,应用此技术已成功地实现了对蛋白质、氨基酸、多 肽等物质的分析,但是现有技术中还没有应用此方法实现对肌氨酸的检测, 因此,要提供一种毛细管电泳电化学的方法以实现对肌氨酸进行高效、快速 且较为便宜的检测。
发明内容
有鉴于此,本发明提供一种肌氨酸的检测方法,以实现对肌氨酸进行高 效、快速且较为便宜的检测。
为实现上述技术问题,本发明提供如下技术方案:
一种肌氨酸的检测方法,包括:
提供毛细管电泳电化学发光检测用毛细管;
向所述毛细管电泳电化学发光检测装置中添加背景缓冲液及吡啶钌系衍 生物;
向所述毛细管中注入运行缓冲液,并在所述毛细管内填充有运行缓冲液 的状态下,向所述毛细管内注入样品溶液;
在所述毛细管两端施加电压,进行毛细管电泳电化学发光检测。
优选的,所述吡啶钌系衍生物具体为联吡啶钌。
优选的,所述提供毛细管电泳电化学发光检测用毛细管的步骤包括:使 用具有阴极性基团的化合物在所述毛细管的内壁上形成阴极性层。
优选的,所述具有阴极性基团的化合物为甲硅烷基化剂。
优选的,所述阴极性层通过共价键键合在所述毛细管的内壁。
优选的,所述毛细管为二氧化硅材质。
优选的,所述背景缓冲液为pH值为7-9的盐溶液。
优选的,所述背景缓冲液为磷酸盐溶液。
优选的,所述运行缓冲液为pH值为7-9的盐溶液。
优选的,所述运行缓冲液为磷酸盐溶液。
本发明公开了一种使用毛细管电泳电化学发光对肌氨酸进行检测的方 法,在本发明中,我们选择吡啶钌系衍生物作为发光试剂,并优选使用具有 高灵敏度和高稳定性的联吡啶钌,通过简单的仪器,实现了对肌氨酸高效、 快速地检测,并且此种方法较色谱-质谱联法相对便宜。
附图说明
图1为本发明实施例公开的一种肌氨酸的检测方法所用的装置示意图;
图2为本发明实施例公开的肌氨酸的电泳检测图。
具体实施方式
在本发明中,所述的电泳缓冲液可以是适用于所需分离的任何已知缓冲 溶液,用于一般电泳,或者具体地说是毛细管电泳。所述缓冲溶液可以是水 相缓冲溶液,也可以是非水相缓冲溶液。水相缓冲溶液的具体例子可以为硼 酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液等,也可以是以肌氨酸为基础的 缓冲液和已知为生物液体的缓冲液。按照本发明,还可以在所述电泳缓冲液 中添加有机溶剂、表面活性剂、离子液体、纳米粒子中的一种或多种,用于 改善分离检测效果,对此本发明并无特别限制。
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