[发明专利]一种桦褐孔菌及从桦褐孔菌中提取三萜类物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地涉及一种桦褐孔菌及从桦褐孔菌中提取三萜类物质的方法。

本发明所称的桦褐孔菌命名为：桦褐孔菌(Inonqqus obliquusLNUF008)，已于2009年11月24日在中国典型培养物保藏中心保藏，编号为CCTCC M 209280。

背景技术

桦褐孔菌Inonqqus obliquus，国内还称为桦癌褐孔菌、斜生纤孔菌。属担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、刺革菌科。

桦褐孔菌的形态：它的子实体呈现肿瘤状(不育性的块状物)，直径25～40cm，深色，表面深裂，很硬，时脆。孢子阔椭圆状至卵状，光滑，有刚毛。菌丝为二系菌丝系统，具有生殖菌丝和骨架菌丝。气生菌丝多为骨架菌丝，黄褐色，具有刚毛状菌丝和稀少刚毛；基内菌丝多为生殖菌丝，淡黄褐色，有隔，无锁状联合。

桦褐孔菌在俄罗斯、波兰、芬兰等地是一种应用很广泛的药用真菌，英文名chaga。1955年，chaga被俄罗斯医学研究院用来治疗肿瘤，特别是消化系统和肺部肿瘤。16世纪至今，东欧一些国家的民间就是用这种菌的菌核来防治癌症。西伯利亚的Khhanty人用这种真菌来预防和治疗心脏病、肝病、胃病和食道疾病等。近期研究表明，桦褐孔菌能抑制艾滋病等病毒(HIV-1)，抗辐射、并通过抑制蛋白质生物合成、抗有丝分裂及消除自由基活性等作用机制来抑制或延缓肿瘤细胞的生长和防治0-157大肠杆菌中毒。

但是，目前桦褐孔菌的使用主要以野生为主。野生的桦褐孔菌主要生长在俄罗斯的西伯利亚地区、日本北海道、芬兰等地。在我国吉林长白上地区和黑龙江大小兴安岭地区有野生桦褐孔菌生长。而采用野生直接使用，其有效成分利用率低。三萜类物质在医学上具有很高的应用价值，现有从桦褐孔菌中提取三萜类物质，提取率较低。

发明内容：

为了解决上述问题，本发明的目的是提供一种桦褐孔菌(Inonqqusobliquus LNUF008)，于中国典型培养物保藏中心保藏，编号为CCTCC M209280。以下简称桦褐孔菌LNUF008。采用此菌，三萜类物质的提取率高。

本发明的另一目的是提供一种从桦褐孔菌中提取三萜类物质的方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种桦褐孔菌，其特征在于：桦褐孔菌(Inonqqus obliquus LNUF008)，2009年11月24日于中国典型培养物保藏中心保藏，编号为CCTCC M 209280。

本发明提供的桦褐孔菌LNUF008的筛选方法为：

自长白山野生林区采摘新鲜的桦褐孔菌子实体(直径22.5cm)，在无菌间内分离菌丝体。首先，从子实体上剜下直径5cm的块，以75％的酒精表面消毒10min，用无菌水冲洗5～6次，0.1％的氯化汞表面消毒1～2min，用无菌水冲洗。用无菌刀将子实体块劈开，用无菌剪从中心菌肉处剜取直径0.5cm小块，移至平皿培养基中，28℃培养5天。

待长出菌落后，将菌落挑入斜面培养基中，培养7天，至斜面长满，得菌株LNUF008，将斜面于4℃冰箱保存。

菌株LNUF008的鉴定如下：

A.菌丝体外部形态观察结果

将斜面中菌丝体接种至固体培养基平皿中央，28℃恒温培养10天，肉眼逐日观察菌丝体外观形态变化。培养3天后，平皿中央菌块周围有白色绒状菌丝出现；培养5天后，菌落不断扩展，菌丝白色但逐渐加粗；培养7天后，菌落扩展到平皿1/2，菌丝体逐渐匍匐于培养基上，由白色逐渐变黄；培养10天后，菌落继续扩展，菌丝体由黄色向棕色转变，并有模糊的环纹出现，菌落表面有菌孔，并出现黄褐色液珠，如图1。从表面形态观察，此菌株LNUF008与桦褐孔菌极为相似。

B.菌丝体显微结构观察

利用载玻片培养观察法对菌株LNUF008菌丝体进行观察。菌丝为二系菌丝系统，具有生殖菌丝和骨架菌丝。气生菌丝多为骨架菌丝，初为白色，宽2.5～4.0μm，具有刚毛状菌丝；基内菌丝体多为生殖菌丝，淡黄褐色，宽3.0～5.0μm，有隔，无锁状联合，如图1。

C.菌株LNUF008的测序及进化树的制作：