[发明专利]一种外生菌根菌菌种保藏方法

说明书

技术领域：

本发明涉及真菌的技术领域，具体地说是一种保藏用于生产菌根食用菌子实体为目的的菌种的方法。

背景技术：

目前菌根菌的大多数可食用子实体都是著名的食用菌，其价格极其昂贵。如松口蘑(Tricholoma matsutake)、黑孢块菌(Tubermelanosporum Vitt.)、意大利白块菌(Tuber magnatum)、松乳菇(Lactarius deliciosus)、红汁乳菇(L.hatsudake)、美味牛肝菌(Boletus edulis)、橙盖鹅膏菌(Amatanita caesarea)、中华块菌(Tuber sinense K.Tao et Liu)、印度块菌(Tuber indicum Cooke etMassee)、鸡油菌(Cantharellus cibarius Fr.)、干巴菌(Thelephoraganbajun Zang)、紫红拟锁瑚菌(Clavulinopsis miyabeana(Ito.)Ito.)、褐环乳牛肝菌(Suillus luteus(L.：Fr.)Gray)、厚环乳牛肝菌(Suillus  greviller(KL.)sing.)、变绿红菇(Russulavirescens(schaeff.)Fr.)、橙盖鹅膏(Amanita caesarea(Scop：Fr.)Pers.ex schw.)、玉蕈离褶伞(Lyophyllum shimeji  (kawam.)Hongo)、烟色离褶伞(Lyophyllum fumosum(Pers.：Fr.)Orton)等，还有灰花纹鹅膏(Amanita fuliginea Hongo)、亚稀褶黑菇(Russula subnigricans Hongo)等极具经济价值的毒菌。

但是对其菌种的保藏一直是一个难题，但是因其独具的特性，在现有的技术条件下，不能象广泛栽培的腐生食用菌(如香菇、木耳等)那样进行保藏，液氮超低温保藏法是目前微生物菌种普遍采用的有效的保藏方法，(大型真菌菌种保藏技术规程，2004)，法国、日本、美国的ATCC等菌物保藏中心都试验过用液氮超低温保藏法保藏外生菌根菌，但至今没有获得成功的突破，众多试验表明仅有少数几个菌种的个别菌株能存活下来，如双色蜡蘑S238N菌株(CORBERY Y.and LE TACON F.，Storage of ectomycorrhizal fungiby freezing.Annales des Sciences Forestières，54，211-217，1997)，鸡油菌的SNGT2-A(ATCC 74488)菌株(Danell E.，Flygh G.，Cryopreservation of the ectomycorrhizal mushroom Cantharellus cibarius.Mycol.Res.106(11)：1340-1342，2002).中国菌物保藏中心食用菌分中心经过多年的实践经验也表明，在目前的保藏方法中，用液氮超低温保藏法保藏的外生菌根菌种98％以上都死亡，采取斜面低温传代法保藏菌种也良莠不齐，菌种严重退化，且经多年转管，有些已面貌全非。目前国外大多采用25℃移接繁殖保藏的方法保存外生菌根菌(如松茸、美味牛肝菌等)，部分采取斜面低温传代法保藏菌种，一般2-3个月就需要转管一次，这不仅费时费力，而且菌种退化严重，容易造成菌种性状丢失，甚至在保藏或转管过程中污染而造成损失。中国专利CN1321172C公开了一种食用菌液体菌种的保存方法。将腐生食用菌液体菌种先经过快速冷冻降温到-40℃～-20℃后，再在-40℃～-20℃温度下进行保藏，经冷冻保存7个月后的液体菌种经解冻活化，接种于固体培养基后75％以上能正常萌发，但没有做过菌根食用菌菌种保藏的实验。中国专利CN92108733.0公开了一种食用菌液体菌种的储存方法，液体菌种储存于一种密闭容器的内腔中，储存温度为1℃～25℃，储存时间最长可以达到90天。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种菌根食用菌菌种的保藏方法，它可填补现有外生菌根菌菌种保藏技术的空白。