[发明专利]一种用高效液相色谱法测定卢帕他定中间体有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明属涉及一种高效液相色谱分离分析方法，特别是一种用高效液相色谱法分离分析卢帕他定中间体有关物质的方法。

背景技术

卢帕他定为新一代抗过敏药物，其中间体结构式：

分子式：C₇H₇NO₂，分子量：137.05

本法有效的对卢帕他定中间体进行纯度分析，本试验采用普通的色谱柱(C₁₈色谱柱)快速准确的实现了卢帕他定中间体有关物质的测定，从而实现了卢帕他定中间体杂质的控制，保证了卢帕他定中间体的质量可控，在的合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离分析卢帕他定中间体有关物质的高效液相色谱方法，从而实现对卢帕他定中间体的质量控制。

申请人发现，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以阳离子对缓冲盐溶液-有机改性剂为流动相，可以实现卢帕他定中间体与其中间体的分离与分析，从而可以准确控制卢帕他定中间体及其制剂的质量。

本发明所说的用高效液相色谱法分离分析卢帕他定中间体的方法，选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以四丁基氢氧化铵磷酸二氢钠缓冲液(pH5.0)-甲醇为流动相。

本发明采用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)。

本发明采用的有机改性剂选自乙腈、甲醇，最优选的有机改性剂为甲醇。

本发明方法的流动相中，四丁基氢氧化铵磷酸二氢钠缓冲液-有机改性剂混合溶液的体积比为85∶15～75∶25。

本发明方法的四丁基氢氧化铵磷酸二氢钠缓冲液的pH值为5.0。

本发明所述的分离分析方法，可按照以下方法实现：

(1)称取卢帕他定中间体样品适量，用流动相溶解样品，配制成每1ml约含卢帕他定中间体0.2mg～2mg的样品溶液。

(2)设置流动相流速为0.8～1.2ml/min，检测波长为268nm。

(3)取步骤(1)的样品溶液5-40μl注入液相色谱仪，完成卢帕他定中间体的分离与分析。

其中：

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-10Avp，SCL-10Avp，DGU-12A

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)

流动相：四丁基氢氧化铵磷酸二氢钠缓冲液(用稀磷酸调节pH值为5.0)-甲醇＝80∶20

流速：1.0ml/min

检测波长：268nm

柱温：室温

进样体积：10μl

本发明能够有效测定卢帕他定中间体的有关物质，方法简单快捷，分析灵敏度高，结果准确可靠。可用于卢帕他定中间体的质量控制，确保原料药和制剂的质量可控。

附图说明

图1实施例1，四丁基氢氧化铵磷酸二氢钠缓冲液(用稀磷酸调节pH值为5.0)-甲醇(80∶20)卢帕他定中间体与中间体混合样品高效液相色谱图

图2实施例2，四丁基氢氧化铵磷酸二氢钠缓冲液(用稀磷酸调节pH值为5.0)-甲醇(80∶20)卢帕他定中间体高效液相色谱图

图3实施例3，四丁基氢氧化铵磷酸二氢钠缓冲液(用稀磷酸调节pH值为5.0)-甲醇(85∶15)卢帕他定中间体与中间体混合样品高效液相色谱图

具体实施方式：以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围

实施例1

仪器与条件

高效液相色谱仪：日本岛津：LC-10ATvp，SPD-10Avp

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)

流动相：四丁基氢氧化铵磷酸二氢钠缓冲液(用稀磷酸调节pH值为5.0)-甲醇(80∶20)

流速：1.0ml/min

检测波长：268nm

柱温：室温

进样体积：10μl

实验步骤

称取卢帕他定中间体10mg，中间体I 2mg，置于10ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液，在上述色谱条件下进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见附图1。

图1中保留时间为6.0分钟的色谱峰为卢帕他定中间体的色谱峰，保留时间为10.4分钟色谱峰为中间体I的色谱峰。色谱图表明卢帕他定中间体与其中间体及杂质可以在同一色谱条件下达到良好的分离。

实施例2

仪器与条件