[发明专利]克林霉素磷酸酯异构体,其分析制备方法和用途

权利要求书

1.克林霉素磷酸酯异构体，其结构式如下式I所示：

2.如权利要求1所述克林霉素磷酸酯异构体的分析制备方法，其特征在于对克林霉素磷酸酯原料进行分析，并从中分离制备所述克林霉素磷酸酯异构体，包括下列步骤：

a)用LC-MS法测定所述克林霉素磷酸酯原料，根据被分析成分的相对保留时间和/或分子量确定所述原料中的克林霉素磷酸酯异构体；

b)根据步骤a)中所述克林霉素磷酸酯异构体的相对保留时间和/或分子量确定柱层析法的条件，使用正相硅胶柱层析富集该保留时间和/或分子量对应的被分析成分；

c)根据步骤a)中所述克林霉素磷酸酯异构体的相对保留时间所显示的色谱保留行为确定制备色谱法的条件，用制备色谱法收集所述相对保留时间对应的被分析成分。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤a)中，所述的LC-MS法测定所采用的流动相pH值为4.00～5.00。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤a)中，所述的LC-MS法测定所采用的柱温为20℃～40℃。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤a)中，所述的LC-MS法测定所采用的流动相包含15％～25％乙腈。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤a)中，所述的LC-MS法测定所采用的流动相包含0.1％～0.3％氨水。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤a)中，所述的LC-MS法测定所采用HPLC条件为：

流动相20％乙腈，0.1％氨水；

pH甲酸调pH至4.90；

柱温25℃；

流速1.0ml/min；

检测波长210nm；

色谱柱Diamonsil ODS C18，5μm，250×4.6mm柱。

8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤b)中，所述的正相硅胶柱层析法富集采用的固定相为100～200目硅胶，流动相为乙酸乙酯和水饱和正丁醇1∶1混合溶剂。

9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤b)包括：

b1将样品溶解于去离子水后，湿法上柱；

b2使用乙酸乙酯∶水饱和正丁醇比例1∶1混合溶剂洗脱，每30ml洗脱液接收一批；在第114批时换乙酸乙酯∶水饱和正丁醇＝1∶1.5混合溶剂为淋洗剂，第177批时更换淋洗剂为乙酸乙酯∶水饱和正丁醇＝1∶2，洗至全部组分淋洗出；

b3合并收集140-162批的洗脱液备用。

10.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤c)中，所述的制备色谱法所采用条件包括：

流动相15％～30％有机相，0.1～0.3％氨水；其中有机相为乙腈和甲醇4∶1的混合溶液；

pH甲酸调pH至4.00～7.00；

柱温：20℃～40℃；

色谱柱Waters μBondapak ODS C18，5μm，7.8mm×300mm柱，或者Agela Venusil ODS XBP C18，5μm，10mm×250mm柱。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，步骤c)中，所述的制备色谱法所采用条件为：

流动相25.5％有机相，0.1％氨水，其中有机相为乙腈和甲醇4∶1的混合溶液；

pH甲酸调pH至6.64；

流速1.0ml/min；

检测波长210nm

色谱柱Agela Venusil ODS XBP C18，5μm，10mm×250mm柱。

柱温25℃

进样量120μl；

收集保留时间为28.467分钟处的峰相对应的被分析物。

12.如权利要求1所述的克林霉素磷酸酯异构体用于制备抗革兰氏阳性菌药物的用途。

13.如权利要求12所述用途，其中所述革兰氏阳性菌包括抗枯草杆菌和金黄色葡萄球菌。

14.根据权利要求2～11中任一项所述方法制备的杂质标准品，其特征在于，所述杂质具有如下结构式I：

15.如权利要求14所述的杂质标准品用于分析克林霉素磷酸酯原料的用途。