[发明专利]香石竹组培种苗快繁培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及香石竹组培种苗快繁结合瓶外生根一次性成苗技术，尤其是香石竹组培种苗的规模化生产技术。

背景技术

香石竹(Dianthus caryophyllus L)又名康乃馨，是石竹科Caryophyllaceae，石竹属多年生草本宿根植物。原产于北欧及南欧。该属约有80种植物，为英属爱尔兰、北欧及南欧的土产植物，喜阴凉、干燥、阳光充足及通风良好的生态环境。香石竹的耐寒性好，但耐热性却较差，最适生长温度为14-21℃，温度超过27℃或低于14℃时，植株生长缓慢。适宜栽植在富含腐殖质、排水良好的石灰质土壤，喜肥。

关于香石竹的组织培养，从80年代起国内外的研究者们就针对香石竹的外植体部位，培养基成分，培养条件，脱毒种子保存等展开了大量的研究工作，但这些均局限于对组培技术中某个环节的研究，虽然香石竹种苗组培技术研究及规模化生产在国内也有报道，但是未系统地涉及到香石竹瓶外茎段微插生根的一次性成苗技术。

传统的组培种苗是在继代瓶苗的基础上用茎尖进行生根培养，其生根系数不高，生根后移到珍珠岩基质中进行前一级过渡，待成活后再移栽到混合基质中进行二级过渡，此时培育的幼苗杆细且个高，因而不易成活。加之传统组培苗产量低，培养程序复杂，成本高，已难于满足市场需求。因此，必须对现有技术加以改进。

发明内容

为简化培养过程，提高种苗成活率，降低成本，本发明提供一种香石竹组培种苗快繁培养方法。

本发明通过下列技术方案完成：一种香石竹组培种苗快繁培养方法，包括外植体切段与消毒，外植体诱导培养、增殖培养和生根培养，其特征在于生根培养在下列条件下进行：

将增殖培养至长出4对叶以上的增殖苗剪切成带1～2对叶的茎段，经消毒处理后，茎基部蘸含300～500mg/L激素的生根水，插入下列质量比的培养基中：草炭∶腐殖土∶珍珠岩＝2.5～3∶0.5～1∶0.8～1，浇透水，在一层塑料膜和一层遮光率为75％的遮阴网，湿度在95％以上的严实且不漏气条件下，生根培养1～5天；再在上午是一层塑料膜，下午是一层塑料膜和一层遮光率为75％的遮阴网，湿度在95％以上的条件下，生根培养5～14天；之后去除塑料膜，只在一层遮光率为75％的遮阴网，温度为18～26℃，湿度为85-90％的条件下，培养至种苗直立即可去除遮光率为75％的遮阴网；之后每周对叶面喷施1-2次1/4MS营养液，并酌情在潜叶蝇、夜蛾多发季节喷施农药防治，农药浓度为800-1000倍液体，直至长成生根苗。

所述消毒处理是：在消毒液为甲基托布津溶液，或者多菌灵溶液，或者百菌清溶液中的一种或几种，消毒液的浓度为800～1000倍的条件下，浸泡20～60秒，且消毒液均为市售产品。

所述农药为爱福丁，或强敌315，或斑潜净，或阿维菌素中的一种或几种，使用时将农药配成浓度为800～2000倍的液体，农药均为市售产品。

所述外植体切段与消毒均为现有技术中的常规方法。

所述外植体诱导培养采用的培养基为：MS+1.0～1.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤+0.1～0.5mg/L的萘乙酸+30000mg/L的蔗糖+7000mg/L的琼脂，培养条件为：培养温度：25±2℃，光照时间：10～12小时/天，光照强度：1500～2000Lx。

所述增殖培养采用的培养基为：MS+0.1～0.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤+0.1～0.5mg/L的6糠氨基嘌呤+0.1～0.5mg/L的萘乙酸+30000mg/L的蔗糖+7000mg/L的琼脂，培养条件为：培养温度：25±2℃，光照时间：10～12小时/天，光照强度：1500～2000Lx。

本发明提供的香石竹组培种苗快繁培养方法具体步骤如下：

A、取材及灭菌：在已开花的植株中选花型正常、花色纯正、枝条挺直、无病虫害、株形饱满的单株，洗净、消毒后，进行无菌操作切段接种；

B、诱导培养：将A步骤所得外植体切段接种到下列诱导培养基中，即：MS+1.0～1.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤+0.1～0.5mg/L的萘乙酸+30000mg/L的蔗糖+7000mg/L的琼脂，在温度为25±2℃，光照时间为10～12小时/天，光照强度为1500～2000Lx的培养条件下，进行诱导培养至顶芽长高并分化出侧芽；