[发明专利]一种用高效液相色谱法测定瑞格列奈中间体有关物质的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种高效液相方法，特别是一种瑞格列奈中间体3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的高效液相色谱法测定方法。

背景技术：

瑞格列奈为一种非磺酰脲类促胰岛素分泌剂，是第一个餐时调节体内血糖新药，具有吸收快、代谢迅速、安全性好等特点。3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐是合成瑞格列奈合成过程中的重要中间体，分子式为C₂₂H₃₆N₂O₄，其化学结构式如下：

3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐的主要中间体杂质有2个，其在其合成过程中生成，对于最终产品的质量生产过程的质量控制是非常重要的。

本法采用氰基柱快速准确的实现了3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的测定，从而实现其中间体杂质的控制，保证了瑞格列奈的质量可控，具有现实意义。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种用高效液相色谱法分离测定瑞格列奈中间体3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的方法，可用于3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐的制备过程和最终产品的质量控制。

本发明提供一种用高效液相色谱测定瑞格列奈中间体3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的方法，选用氰基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以甲醇为有机相与以0.5％磷酸溶液为水相的混合溶剂作为流动相，

本发明提供一种用高效液相色谱测定3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的方法，流动相中的有机相为甲醇，甲醇与水相的比例为：20～50∶80～50。

本发明提供一种用高效液相色谱测定3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的方法，流动相中的有机相为甲醇，甲醇与水相的比例为：35∶65。

本发明提供一种用高效液相色谱测定3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的方法，所述水相为磷酸水溶液，其浓度范围为0.1～0.8％

本发明提供一种用高效液相色谱测定3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的方法，所述水相为磷酸水溶液，其浓度为0.5％。

本发明提供一种用高效液相色谱测定瑞格列奈中间体3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的方法，可按以下方法实现。

取3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐适量，用流动相溶解，配制成浓度为0.5mg/ml的样品溶液，流速为1ml/min，检测波长210nm，选用氰基柱。取样品溶液20ul，注入高效液相色谱仪，完成3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的测定。

1)取3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐适量，用流动相溶解样品，并配制成浓度为0.5mg/ml的样品溶液。

2)设置流动相流速为0.5～1.5ml/min，流动相的流速优选为1ml/min；检测波长200～250nm，最佳检测波长为210nm；选用氰基柱。

3)取1)的样品溶液10～50ul，优选20ul，注入高效液相色谱仪，完成3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的测定。

本发明能够有效测定瑞格列奈中间体3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐的有关物质，方法简单快捷，分析灵敏度高，结果准确可靠。可用于3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐的质量控制。

附图说明

图13-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐及其中间体杂质的液相色谱图

图23-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐原料的高效液相色谱图

具体实施方式：

以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。

实施例1

仪器与条件

日本岛津LC-10ATVP泵，岛津SPD-10AVP紫外可见光多波长检测器，RHEODYNE 7725i进样器及TL9900色谱数据工作站，色谱柱：氰基柱250×4.6mm，5μm，紫外检测波长：210nm，流动相：0.5％磷酸溶液-甲醇(65∶35)。

实验步骤